Lentivirus慢病毒介导的siRNA活体实验用病毒液服务
代做实验,Lentivirus慢病毒,实验外包
技术服务详细描述
Lentivirus 载体的技术特点
大大提高对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分裂的细胞等转导效率
快速获得高水平的表达
目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
将**反应降到*低
能够插入大的片段(~7.5 kb)
能够应用于干细胞研究
*低的细胞毒性
本公司使用的慢病毒表达系统,它由三部分组成:
慢病毒表达载体
慢病毒包装质粒
可产生假病毒颗粒的细胞系
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
服务流程
对于活体 RNAi实验模型,吉玛公司可以为您生产高质量的病毒液,服务流程如下:
根据目的基因相关信息(序列,序列号等),利用高效的设计软件,设计 siRNA序列,针对每条目的基因,我们设计3条siRNA序列,其中1条序列为阴性对照组;
根据设计好的 siRNA序列,设计,合成两条互补的短片段的DNA;
对合成好的 DNA片段进行稀释,退火,连接到线形化处理过的载体,转化,涂平板,过夜培养;
通过 PCR的方法筛选阳性菌落,进行测序,分析测序结果;
对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量的不含内**的 siRNA病毒穿梭质粒;
利用构建好的质粒做转染实验, 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因,筛选出一条*有效的siRNA序列;
筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞,进行病毒包装和生产,收集病毒液;
浓缩、纯化病毒液,测定滴度;
提供高质量的病毒液给客户(对于活体实验,我们提供的病毒基本单位为 1×108ifu ,这个单位为一只小鼠一次实验的平均用量)
代做实验,Lentivirus慢病毒,实验外包
上海拜沃生物科技有限公司
联系电话:021-51262103,021-51262102
传真:021-51262103
网址:www.biovol.net 网址:www.elisabio.com
联系人:黄力,业务qq: 769201598
公司对外邮箱:,hyperheal@gmail.com
上海拜沃生物是美国sciencell公司在中国签约**代理,本公司提供的美国Sciencell人正常细胞。作为美国Sciencell公司中国区总代理,在细胞,培养基,培养试剂产品方面, 我们公司有着专业的细胞培养知识,合理的价格,完善的售后服务,是您实验的*佳选择。
注:本公司细胞均为美国原包装产品,非国内传代的假货。请购买者注意,如果买假了,原代细胞一共就几代左右可以使用的。