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上海拜沃生物科技有限公司
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风疹 IgG 抗体elisa试剂盒说明书
风疹 IgG 抗体elisa试剂盒说明书
体外诊断试剂使用说明书
风疹 IgG 抗体检测试剂盒(酶联**法)
(Rubella IgG ELISA TEST SYSTEM)
【产品编号】 9Z9801G
【临床意义】
风疹(rubella)是由风疹病毒引起的一种常见的急性传染病。以
发热、全身皮疹为特征,常伴有耳后、枕部**结肿大。孕妇在妊
娠前 3 个月内感染风疹后,风疹病毒可以通过胎盘感染胎儿,使胎
儿发生先天性风疹或先天性风疹综合征。典型的风疹病人的诊断通
常采用病毒分离或血清抗体(IgG、IgM)测定。Rubella-IgG 主要用
于诊断风疹病毒的即往感染。一般在感染 2-3 周血清中出现 IgG 抗
体,半年达高峰,并可持续阳性结果数年。
【检测方法原理】
宙斯公司生产的 Rubella-IgG 抗体检测试剂盒采用酶联**法
定性或半定量检测人血清中 Rubella-IgG 抗体的浓度。微板中的免
疫抗原与血清样本的特异性抗体相结合,形成抗原抗体复合物,在
过氧化物酶的作用下产生颜色变化,溶液颜色的深浅与原始待测样
本中的抗体浓度有关,通过测定在 450nm 处吸光度的变化判断血
清中 Rubella-IgG 抗体的含量。
【试剂盒的组分】
组分 装量 组分 装量
酶标板 96 孔 显色液(TMB) 15ml/瓶
校** 1 瓶 样品稀释液 30ml/瓶
阴性对照 1 瓶 浓缩洗板液(10X) 100ml/瓶
阳性对照 1 瓶 终止液 15ml/瓶
酶联物 15ml/瓶
【试剂盒规格】 96T/盒
【标本要求】
1.标本应视为有潜在的传染性。建议根据 NCCLS 的 M29 号文件
来采集标本。
2.以无菌静脉穿刺取血,经新鲜沉降和冷藏获得的血清为标本。不
得使用抗凝剂和防腐剂。避免使用溶血、脂血和**污染的血清。
3.标本在室温(20-25°C)保存不得超过 8 小时。在 2-10?C 保存不得
超过 48 小时。如长久保存应置于-20?C 或更低。避免标本反复
冻融。
【试验前准备】
1.浓缩洗涤液(10X)用双蒸水稀释成 1X(至 1000ml)。未用完的放回
2-8°C。
2.血清标本和试剂盒在使用前应恢复至室温(20-25?C)。
3.阳性对照、校**、阴性对照和病人的血清样品用样本稀释液按
1:21 倍数稀释(即 10?l 阳性对照/校**/阴性对照/病人血清样
品加入 200?l 样品稀释液中)并充分混匀。
【操作步骤】
1.加样:分别取稀释过的阴性对照、阳性对照、校**和血清样品
100?l 加入到对应的反应孔中;取 100?l 样本稀释液加入到对应
孔中作为试剂空白对照。
2.温育:温度:室温(20-25?C) 时间:25?5 分钟。
3.洗板:5 次。
洗板
方式
步 骤
手工
洗板
①甩掉孔中的液体。②在每个孔内加入洗板液,确保孔中
无气泡。③重复以上两步,洗板 5 次。④甩掉孔中的洗板
液,并在纸巾上拍干至目测微孔中无残留液。收集洗板液
至废液缸中,并在实验完毕后用 0.5%次氯酸钠处理。
自动
洗板
在自动洗板机上设定洗液体积 300-350?l/孔,洗板次数五
次。洗完后置于纸巾上拍干。
4.加入酶联物:每孔中加入酶联物 100?l。
5.温育:温度:室温(20-25?C) 时间:25?5 分钟。
6.洗板:重复步骤 3 的操作进行洗板。
7.加入显色液(TMB):每孔中加入 TMB 100?l。
8.温育:温度:室温(20-25?C) 时间:10-15 分钟。
9.加入终止液:每孔加入终止液 50?l 以终止反应。
10.读数:在加入终止液 30 分钟内,将微孔板置于 450nm 波长下
读取每个孔的光密度值,以空白试剂作对照。
【结果判定】
1.质量控制
校**、阳性对照、阴性对照的 OD 值应符合以下要求:
项目 OD 值范围
阴性对照 O D 值 阴 性 ≤0.250 OD OD 值阴性 值校正≤0.9
校** O D 值 校 正 ≥0.300 OD OD 值阳性 值校正 ≥1.25
阳性对照 O D值 阳 性 ≥0.500
注:如不符合上述要求,认为本次试验无效应重复试验。
2.结果计算
标本参考值= (CF 值标于盒内附的不干胶标签上)
参考值判断:
结果 标本参考值
阴性标本 ≤0.90
可疑标本 0.91-1.09
阳性标本 ≥1.10
②半定量:
标本的浓度值= (CV 值标于盒内标签上)
浓度判断:
结果 标本浓度(IU/ml)
阴性标本 ≤8.18
可疑标本 8.19-9.99
阳性标本 ≥10.0
【参考值】
正常人群Rubella-IgG抗体呈阴性(标本参考值≤0.90或浓度≤
8.18),每个实验室应根据当地实际情况建立自己正常值参考范围。
【注意事项】
1.酶标板应平衡到室温后从铝箔袋中取出,剩余的板条立即放回铝
箔袋中并封好(保留铝箔袋)。
2.试剂和样本的交叉污染会导致错误的结果。
3.避免不同批次的试剂混合使用。
【贮存】
试剂盒应在 2-8°C 下保存。
OD
CV
OD
?
标本
校正
值
值
OD
OD CF ?
标本
校正
值
值
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联系人:李波
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