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三大新型流式细胞仪选购比较(上)

                                                                       三大新型流式细胞仪选购比较(上)

近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪,让这一技术变得更加容易操作,也更加实惠了。目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的,相关试剂盒也经过了多次验证,简化了操作,降低了入门门槛。一些大型的公司,比如Sony和BD加大了研发力度,开发出了10万美元以下的流式细胞仪,客户群由核心实验室转向了个体研究人员。

流式细胞分析技术在现代细胞分子生物学研究中起着越来越重要的作用,这种分析技术是通过对单个细胞性状的快速测定,并结合先进的计算机分析系统,使得在短时间内可对大量细胞进行定性、定量测定。但以往进行流式细胞仪操作和分析需要技术熟练的研究团队,而且这一设备价值也不菲——起码也要10万美元,有些甚至达到50万美元,这对于许多实验室来说并不容易负担。

近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪,让这一技术变得更加容易操作,也更加实惠了。目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的,相关试剂盒也经过了多次验证,简化了操作,降低了入门门槛。一些大型的公司,比如Sony和BD加大了研发力度,开发出了10万美元以下的流式细胞仪,客户群由核心实验室转向了个体研究人员。

 

 

但是这些新型的流式细胞仪也不是说就能立即上手的,用户在购买之前要弄清楚这一技术到底能做什么,不能做什么,有时实验室购买了流式细胞仪后觉得又不适用了,这样即浪费资源,也耽误时间,因此了解自己需要什么,了解不同仪器的优缺点十分重要。以下是目前市面上较受关注的几个新型流式细胞仪,通过分析它们的优点和缺点,也许您在选购的时候就更有目的性了。

今年2月,BD公司(Becton, Dickinson and Company) 收购了美国密歇根州AnnArbor市的Accuri Cytometer公司,这家公司是一家开发和生产科研型个人化流式细胞仪的仪器制造商。而C6 FlowCytometer就是Accuri Cytometer公司的一款旗舰产品。

AccuriC6流式细胞仪相关产品有助于BD进入到新兴的低成本个人化流式细胞仪市场,这也就是说C6流式细胞仪这款全功能、双激光、六探测器的流式细胞仪分析系统具备操作简单,成本底的特点。

首先C6流式细胞仪能避免操作新手的一个容易犯的错误——调整电压,同步化不同的细胞。一般来说,只要关闭了电压设施,那么就不可能再恢复数据了,除非你愿意重新来一次。而且在流量控制方面,C6流式细胞仪采用的是**低压流动系统(蠕动泵),而不是真空泵,因此可以**控制样本进样速度和活性区流的直径,这就能为样本选择*佳的活性流区的大小。

在性能方面,C6流式细胞仪的探测器不但可灵敏的捕获前散射光和旁散射光,还有四个可调光学滤光片的荧光探测器。这一台仪器可以实时收集1600万个通道的数据,在分析过程中,C6流式细胞仪的动态范围消除了对探测器进行补偿的必要性,当使用Cflow软件的Zoomfunction模式观察一个特定通道时,其他数据仍然被监测并且记录到数据文件。

Cflow软件是C6流式细胞仪的操作分析系统,这一操作系统能简单快速的搜集分析数据加上高集成度、高度自动化的主机,以及优良人机界面,研究人员经过半个小时的培训,就可以灵活、准确的使用C6流式细胞仪系统。

除此之外,C6流式细胞仪安装和维护也很简单,这一系统拥有自动除污和清洗流路程序。当关闭主机时,自动化系统会自动用清洗液清洗流路系统,然后再使之充满鞘液。鞘液会保持在流路系统中,直到下次开机。在使用过程中,如果需要启动清洗流程,那么点击一下鼠标就可以了。

而且现在,如果购买的机器出了问题不能解决,Accuri还会在维修机器期间,给用户寄另外一台机器来替换使用,避免耽误实验。

当然这台机器也存在其缺点,首先C6流式细胞仪的软件系统还在发展阶段,缺乏一些功能,比如其软件系统由于图形不能扩展,因此无法得到高质量的图像。要解决这个问题,可以采用第三方软件,比如FlowJo进行编辑。

另外C6流式细胞仪设计小巧灵便,这是其优点也是其缺点,因为容量问题也限制了它可容纳的激光源和检测器的数量。*后这一仪器冲洗速度比同类型其它一些机器慢,因此如果样品比较多,可能比较费时间。

 

密理博guava easyCyte系列产品(2009年密理博收购Guava Technologies公司)有EasyCyte5、6和8三个成员,这一系列机器是全球头个利用微毛细管技术为核心的细胞分析平台,摒弃了传统的鞘液流方式,采用独有的微毛细管液流(上样)设计,因而不需要鞘液,减少样本和样本处理时间和试剂。相关产品简单便捷,*基础的EasyCyte5就是一个简单单激光,能检测三种颜色的机器。

easyCyte系列产品的优点主要在于系统不需要鞘液,这样每8小时的废液产生量不超过50ml。且上样体系小,每个test只需1000-10000个细胞,减少样本和样本处理时间和试剂。Guava独有的上样系统预设了1块96孔板与10个单样品管(1.5ml或0.5mltube)的位置,使得高通量上样与中低通量上样可同时完成,避免了从中低通量到高通量上样时需要手动切换所带来的麻烦。

另外在一些应用方面,easyCyte操作简便,比如细胞凋亡检测实验,采用类似AnnexinV.标准检测试剂盒的标记物,及其自带的分析软件模块,就能分析数据了。

获得2009年年度**产品称号的guava easyCyte?8HT细胞分析仪,其软件系统发展得更加完善,在采访过程中,我们了解到Guava设计了两款智能化软件控制,以配合不同层次的需求。guavaSuite就是一套为细胞凋亡研究的学者而设计的软件,包括了AnnexinV, Tunel, Cell Cycle等经典实验,同时可以进行细胞**计数���细胞毒实验的研究。

这一软件*大的特点是预设了补偿参数和实验模块,一键式完成实验数据的获取。Incyte软件是为高通量数据分析度身定做的软件,通过IncyteHeapMap功能可同时显示6*96个数据信息,直观化的信息显示更有效地帮助学者做出快速准确的判断。另一方面,Millipore**地将并IC50/EC50的分析功能切入流式分析软件中,可通过一组凋亡数据获得凋亡分析结果和IC50/EC502项结果。

除此之外,easyCyte的系统和维护也是自动化的,这也就是说没有经验的研究人员人员也可以成功的操作这一机器。同样这一优点实际上也造成了一些问题——这种自动化会导致机器缺乏灵活调控的能力,一些核心实验室和熟练的操作人员因此可能就无法调整一些选项了。

另外一个方面,佛罗里达大学流式细胞仪科技主任NealBenson认为,从理论上说,微毛细管系统分析仪比传统流式细胞仪更容易堵塞,尤其是分析大微粒的时候,这些微粒流动的慢,可能会引起流动微粒阻隔。当然这一观点还未得到实际实验的证实,而且不同的实验操作出现的情况也不一样。