摘要：使用K9860自动定氮仪对食品中蛋白质含量进行测定, 本文考察了方法的准确性和重现性。实验数据表明, 结果令人满意。
关健词：自动定氮仪；食品；蛋白质
Using Automatic Instrument ofNitrogen to DetermineProtein Infood
Chengxiaoliang Wangyan
（Application laboratory of Hanon,Shandong, Jinan 250101）
Abstract:This paper discusses the accuracy and reproducibility of the methodhow to determin the protein of food with automatic instrument of nitrogen, Experimental data shows that the method is quick andaccurate.
Keywords:automatic instrument of Nitrogen；food；protion
1 前言
食品中的蛋白质含量是衡量食品品质、营养价值的重要指标，是常规理化检测中必须测定的指标，蛋白质含量测定方法一般来说，有以下五种：凯氏定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）、紫外吸收法和考马斯亮蓝法（Bradford法）[1]。
凯氏定氮法常用于有机化合物中的氮含量的测定，是蛋白质含量测定的经典方法[2]，虽然在测试过程中，试剂用量很大，但是不可否认，它所适用的样品范围广，具有测定结果准确度和精密高度等优点。因此凯氏定氮法是食品分析、营养和生化研究中*广泛测试方法[3,4]。迄今为止一直作为国内外的标准方法.其基本原理是将食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
2 材料与方法
2. 1 仪器与试剂
2.1.1 K9860全自动凯氏定氮仪。
2.1.2 样品消解装置 SH520 石墨消解仪。
2.1.3 硫酸（密度1.8419g/mL）。
2.1.4 硫酸钾。
2.1.5 硫酸铜（CuSO4·5H2O）。
2.1.6 硼酸溶液（20g/L）。
2.1.7 氢氧化钠溶液（400 g/L）。
2.1.8 硫酸标准滴定溶液[c(1/2H2SO4)=0.0500mol/L]或盐酸标准溶液[c(HCl)=0.0500mol/L]。
2.1.9 混合指示剂：1份甲基红乙醇溶液（1g/L）与5份溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L）临用时混合。
2. 2 测定方法
称取或移取适量样品放入消化管，加入0.2 g硫酸铜，6 g硫酸钾及20 mL硫酸，稍摇匀后，把消化管放入消解仪，采用直线升温方式（若样品易起泡，建议采用曲线升温方式），将样品消化呈透明蓝绿色液体后，再继续消化0.5-1 h。取下放冷，将消化管放入K9860全自动凯氏定氮仪，设置好相应参数，仪器自动蒸馏、滴定、计算并打印结果。
3 结果与讨论
3. 1 精密度测定
取蛋白质含量不同的5 种样品,每一种样品平行测定6 次，结果见表1，测定结果的相对标准偏差(RSD) 均小于2 % ,表明K9860全自动凯氏定氮仪的**度良好。
表1 仪器精密度测定
样品名称 | 蛋白质含量（g/100g） | 平均值（g/100g） | 相对标准偏差(RSD %) |
豆浆 | 1.90 | 1.91 | 1.92 | 1.92 | 1.03 |
1.92 | 1.93 | 1.92 |
酸奶 | 0.76 | 0.75 | 0.74 | 0.75 | 1.05 |
0.73 | 0.74 | 0.75 |
纯牛奶 | 3.20 | 3.22 | 3.21 | 3.21 | 1.21 |
3.20 | 3.23 | 3.22 |
市售奶粉 | 25.12 | 25.14 | 25.11 | 25.13 | 1.22 |
25.12 | 25.14 | 25.12 |
即食海参 | 76.20 | 76.22 | 76.23 | 76.22 | 1.60 |
76.22 | 76.20 | 76.24 |
3. 2 准确度测定
蛋白质含量不同的5 种样品，进行加标(硫酸铵) 回收试验，结果见表2，硫酸亚铁铵的回收率在99 %以上,表明K9860全自动凯氏定氮仪准确度良好。
表2 仪器准确度测定
| 样品含氮量(mg) | 加标量(mg) | 总氮量(mg) | 测得总氮量(mg) | 回收率(%) |
1 | 30.02 | 12.00 | 42.02 | 41.96 | 99.9 |
2 | 15.42 | 25.02 | 40.44 | 40.36 | 99.8 |
3 | 7.91 | 28.12 | 36.03 | 35.93 | 99.7 |
4 | 25.02 | 25.08 | 50.10 | 50.20 | 100.1 |
5 | 30.14 | 30.20 | 60.34 | 60.20 | 99.8 |
3. 3 方法对比
用K9860全自动凯氏定氮仪和经典的凯氏定氮法分别对5种样品测定其蛋白质含量，结果见表3，结果表明，两种方法对同一样品的测定结果无差异显著性( t = 1. 0 ,P > 0. 05)。
表3 两种方法对比试验
| 仪器法 | 经典凯氏定氮法 |
1 | 1.15 | 1.13 |
2 | 2.75 | 2.79 |
3 | 20.28 | 20.32 |
4 | 40.45 | 40.49 |
5 | 79.22 | 79.18 |
4．小结
由上述实验结果,我们看出K9860全自动凯氏定氮仪具有操作简便快速、省时省力准确度高、精密度高等特点。它与经典的凯氏定氮法作比较，测定食品中蛋白质含量，结果令人满意。
5．参考文献
1.陈鸿琪.蛋白质检测方法的进展. 理化检验-化学分册,2000 ,36(7):333.
2.于守洋,刘志诚.营养与食品卫生监督检验方法指南.北京:人民卫生出版,1989:44-47.
3.谢平会,杨征武,祝丽玲. 电流法快速测定蛋白质. 中国乳品工业,2000,28(4) :33-35.
4.王丹红,周黎榕,傅弘毅,等.采用模块式消化-全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质.福建分析测试, 2004, 13(2):1949-1951.