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(原核)可溶蛋白表达|实验技术服务
关键词:(原核)可溶蛋白表达|实验技术服务
简介:世界**品牌(原核)可溶蛋白表达|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
(原核)可溶蛋白表达|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:(原核)可溶蛋白表达|实验技术服务 http://www***********.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
实验描述
利用基因合成、cDNA克隆、反转录等方法,获得目的基因,将目的基因亚克隆至表达载体pSumo-Mut,目的基因在N端融合Sumo标签蛋白,通过测序和酶切验证,确证获得亚克隆正确的表达质粒。
利用构建好的表达质粒,转化Arctic Express宿主菌, 在11度低温IPTG诱导条件下,SDS-PAGE检测目标蛋白表达情况,确认蛋白分布在上清或是沉淀中。
如果目标蛋白产物分布与上清中,通过Ni柱亲和纯化, 获得目的蛋白;如果目标蛋白分布于沉淀中,则通过包涵体梯度洗脱后,重溶获得目标蛋白,必要的话,重溶蛋白在进一步通过亲和纯化提高纯度。
纯化后的蛋白经过Sumo蛋白酶酶切,蛋白N端将会彻底裸露,不留任何氨基酸残基,酶切后的混合物经Ni柱亲和纯化,可以去除融合蛋白、Sumo标签蛋白和Sumo蛋白酶,剩余的蛋白即为酶切后目的蛋白。
服务内容
针对客户蛋白表达不理想的问题,我公司根据客户提供的基因序列对实验进行整套优化(基因设计、基因优化、基因合成、亚克隆、蛋白表达条件优化及可溶性测试、原核蛋白表达及检测),并提供给客户实验中每个步骤详细的实验报告。
交付
实验各阶段的实验评估报告(分为密码子优化报告、载体-宿主优化报告、表达条件优化报告和蛋白可溶性评估)
如果客户需要蛋白,我们可提供:
>5mg 可溶性蛋白
蛋白纯度>90%
融合标签蛋白
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