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DNA合成|实验技术服务

关键词:DNA合成|实验技术服务
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测序实验流程：
DNA复制的一般过程：
DNA双螺旋是由两条方向相反的单链组成，复制开始时，双链打开，形成一个复制叉(replicative fork,从打开的起点向一个方向形成)或一个复制泡(replicative bubble，从打开的起点向两个方向形成。)两条单链分别做模板。各自合成一条新的DNA链。由于DNA一条链的走向是5′→3′方向，另一条链的走向是3′→5′方向，但生物体内DNA聚合酶只能催化DNA从5′→3′的方向合成。那么，两条方向不同的链怎样才能做模板呢?这个问题由日本学者岗崎先生解决。
原来，在以3′→5′方向的母链为模板时，复制合成出一条5′→3′方向的前导链(leadingstrand)，前导链的前进方向与复制叉打开方向是一致的，因此前导链的合成是连续进行的，而另一条母链DNA是5′→3′方向，它作为模板时，复制合成许多条5′→3′方向的短链，叫做随从链(lagging strand)，随从链的前进方向是与复制叉的打开方向相反的。随从链只能先以片段的形式合成，这些片段就叫做岗崎片段(Okazaki fragments)，原核生物岗崎片段含有1000-2000核苷酸，真核生物一般100?00核苷酸。*后再将多个岗崎片段连接成一条完整的链。由于前导链的合成是连续进行的，而随从链的合成是不连续进行的，所以从总体上看DNA的复制是半不连续复制。
1、DNA复制机理--半保留复制
半保留复制(semiconservative replication)是DNA生物合成的一个重要特征。是指DNA合成(复制)时，双链解开，分别作为模板(template)指导DNA的合成，合成的子代新生双链DNA中，总有一条来自亲代DNA......
2、DNA复制的酶类
参与DNA复制的主要物质有:底物，即dATP,dGTP,dCTP 和 dTTP，总称为dNTP; DNA聚合酶(polymerase);模板(template)，即双链DNA解开形成的单链;引物(primer),引导新生DNA的产生;其他......
3、DNA复制过程
DNA复制时，首先需要解开双链，再生成引发体，在引发体的基础上开始合成新链。复制中的新链总是沿5′向3′端方向延伸，即底物dNTP去掉焦磷酸并以磷酸二酯键方式连接在延伸中的DNA链3′端的-OH上，一个接一个地叠加。由于DNA的双链的走向......
4、DNA复制过程的调控
原核及其它低等生物与高等生物DNA复制的调控模式可能不同，同一生物的调控模式也可有不同的变化。对DNA复制的调节既有正调节也有负调节。

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