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细胞培养服务|实验技术服务

关键词:细胞培养服务|实验技术服务
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测序实验流程：
生存期
在细胞一代中，细胞能倍增3～6次，经历三个阶段：
1. 潜伏期(latent phase) ：
接种经过悬浮期(细胞质回缩,胞体呈圆球形) 贴壁。
初代培养细胞经过 10～24小时或更多时间。
连续细胞系和癌细胞系经过 10～30分钟贴附。
贴附现象是一个非常复杂和受多种因素的影响。
影响细胞贴附：底物表面不干净，影响细胞贴附。
利于细胞贴附：底物表面带有阳性物质与特殊物质:
纤粘连蛋白(fibronectin FN)、
细胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
这些物质有的存在与细胞表面,有的来自血清。
潜伏期特点：
长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。
(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相，细胞有运动活动。
(2)初代培养细胞潜伏期约为24～96小时或更长，
连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6～24小时。
(3)细胞接种密度大潜伏期短。
(4)细胞出现分裂相增多时，标志细胞进入指数增生期。
实验用品
1. 种类︰
1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌
制品。
1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflask,
plates, dishes, roller bottle 等，依实验需要使用。
1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml
1.4. 塑料离心管: 15 ml, 50 ml，均有2 种不同材质，其中polypropylene (PP) 为不透
明材质，polystyrene (PS) 为透明材质，可依实验需要而选择适合材质之离心管。
1.5. glass pastuer pipet: 9 inch，用以抽掉废弃培养液等。
1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware)：100 ml, 250 ml,500 ml,1000 ml
2. 清洗︰
2.1. 新购玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCl 浸泡数小时，洗净后才开始使用。
2.2. 用过之玻璃血清瓶，以高压蒸汽灭菌，洗净后分别用一次与二次去离子水冲洗干
净，勿加清洁剂清洗。
3. 灭菌︰
3.1. 实验用玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖，高压蒸汽灭菌121 oC, 15 lb, 20 分钟，置于
oven 中烘干。
3.2. 实验用玻璃pasteur pipet 以干热灭菌170 oC, 4 小时。
3.3. 液体或是固体废弃物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸，即漂白水) 或是蒸汽高
压灭菌121 oC, 15 lb, 20 分钟处理。

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