猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 上海** 上海乾思生物科技有限公司

AIRUI 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit（elisa试剂盒） **好的试剂盒

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产品名称：AIRUI 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit（elisa试剂盒） **好的试剂盒
产品型号：乾思生物
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简单介绍

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产品描述

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品牌名称： AIRUI 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit（elisa试剂盒） **好的试剂盒
AIRUI 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit（elisa试剂盒） **好的试剂盒测序实验流程：
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）间接法测抗体
1．酶标抗抗体工作浓度的选择
（1）用100ng/ml人IgG进行包被，洗涤。
（2）将酶标抗人IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。
（3）加底物显色。加酸终止反应后，读取吸亮度（A），绘制曲线如图15-10。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人IgG的工作浓度应为1/1600。
2．棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度
（1）用包被液将抗原作一系列稀释后进行包被，洗涤。
（2）将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1:100稀释，加样，保温，洗涤。
（3）加按工作浓度稀释的酶标抗人IgG抗体，保温，洗涤。
（4）加底物显色。加酸终止反应后读取A值。
夹心ELISA包被抗体和酶标抗体工作浓度的选择
（1）抗体免疫球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10、1和0.1μg/ml，分别在ELISA板上进行包被，每一浓度包括三个纵行，洗涤。
（2）在一个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另一横行加入弱阳性抗原液，第三横行加入阴性对照液，保温，洗涤。
（3）将酶标抗体用稀释液稀释成三个浓度，例如1:1000、1:5000和1:25000。分别加入每一包被浓度的一个纵行中，保温，洗涤。
（4）加底物显色。加酸终止反应后，读取A值。
（5）以强阳性抗原的A值在0.8左右、阴性参考的A值小于0.1的条件作*适条件，据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。从表15-2可看出包被抗体浓度可选用1μg/ml，酶标抗体的稀释度可选为1:5000。为了进一步节省试剂，可以此浓度为基点，缩小间距再做进一步的棋盘滴定。
（5）选择强阳性参考血清的A值为0.8左右、阴性参考血清的A值小于0.1的包被抗的的稀释度作为工作浓度。
ELISA（酶联免疫吸附剂测定）的基本原理有三条：
1. 抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；
2. 抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；
3. 酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
注意事项 :
正式实验时，应分别以阳性对照和阴性对照控制试验条件，待测样品应做一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清，兔血清、BSA或OVA等封闭。
【生物分子】抗生素/抗真菌素维生素氨基酸核苷酸脂糖类白三烯前列腺素药物结合物抗氧化剂药理活性化合物类固醇激素结合物半抗原反应半抗原载体结合物放射性核素血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物亲和素/链霉亲和素
【蛋白质/抗原/多肽】免疫球蛋白封闭肽人蛋白和抗原小鼠蛋白和抗原细菌蛋白和抗原病毒蛋白和抗原植物蛋白和抗原其它蛋白和抗原细胞质蛋白总蛋白膜蛋白核蛋白细胞裂解和提取物线粒体蛋白细胞裂解组织提取重组细胞因子
【常用生化试剂】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水分子生物学缓冲液蛋白生化缓冲液去垢剂染色试剂溶剂酸碱化学试剂其它生化试剂
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR试剂 PCR对照特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA 载体及构建 PCR克隆载体 M13克隆载体细菌克隆载体文库及构建 cDNA文库基因组文库噬菌体展示文库
【酶】限制性内切酶蛋白酶核酸酶激酶聚合酶连接酶
【cDNA及合成纯化】cDNA全长基因 RNA cDNA合成 cDNA相关试剂
【核酸/蛋白合成】Oligo纯化核酸合成柱核酸合成试剂
【克隆与表达】克隆基因克隆试剂盒克隆筛选
【表达分析】 Northern印迹分析分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝胶制备蛋白电泳试剂预制蛋白凝胶
【核酸纯化】 DNA凝胶纯化 DNA提取纯化 PCR产物纯化
【RNAi技术】 siRNA 反义寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文库
【蛋白检测】 Western印迹报告基因检测蛋白检测试剂盒
【实验动物】转基因动物小鼠大鼠模式动物
【临床检测试剂】生化检测遗传学检测血液检测
【相关检验试剂】食品**检测药品**检测
【蛋白纯化】蛋白提取蛋白透析蛋白定量蛋白稳定
【细胞培养】血清血清替代物细胞培养基细胞细胞株感受态细胞新鲜细胞分离
【干细胞】干细胞/祖细胞原代细胞干细胞培养基
【蛋白修饰】蛋白标记载体蛋白结合其它
【细胞生物学检测】细胞凋亡细胞分离细胞增殖
【药物筛选】荧光素细胞活力/增殖/毒性检测
【免疫检测】放射性免疫检测化学发光免疫检测
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