脂质体的制备方法——超声法

脂质体的制备方法——超声法

对于各种磷脂水分散体进行超声处理，是zui早采用的处理两亲性脂质的机械方法之一。由于局部受热和高能量的输入，样品不必加热到相变温度上。

超声技术有两种：一种是将超声仪的探头进入脂质体分散体中；另一种是将样品放在试管或烧杯内，再置于水浴式超声仪中。

探头式超声可能是小规模制备SUV应用zui广泛的方法。此法将jigao的能量输入脂质分散体中，可直接用于MLV。探头处能量的释放会导致局部过热，因此（盛有样品的）容器必须进入冰/水浴中。注意: 超声达到1h，会有5%以上的磷脂发生脱酯化（水解）。

超声法制备脂质体

设备与试剂

简易台式离心机

自制的专用耐热玻璃锥形离心管（也可用普通烧瓶，如25mL或50mL的圆底烧瓶）

超声波细胞破碎仪

1. 棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱  （DPPC）

   方法

1. 取1-10ml MLV 分散体（参照手摇法）置于锥形离心管中，之后放在0℃水浴中

2. 将超声波细胞破碎仪的换能器探头浸入样品中，并准确调整其高度至稍高于容器底部1cm(0.4英寸）。

3. 通入氮气（如果使用不饱和磷脂，此步骤尤为重要）。

4. 接通超声波细胞破碎仪，调节超声功率至输出功率为100W左右。

5. 将定时器设为10—60min，有效超声时间为50%—100%。分散体必须从乳白色转变为呈乳光状—对着日光能透过样品看清窗框。

6. 用简易台式离心机12000r/min离心10—15min，除去较大的粒子（<3%）和从换能器探头上脱落的金属屑（钛）。

   注：超声法制得的小囊泡（d<40nm）通常处于亚稳态。融合成直径为60—80nm的囊泡后，可将脂质双分子层的高曲率能量释放出来。因此，建议将囊泡置于暗处，室温放置过夜。100000g离心1h除去经探头超声后仍存在的小部分MLV。许多可被包封的分子经过剧烈超声都会受到破坏。

   摘自《药学专著译丛——脂质体（原著第2版）》