数字PCR技术,是通过将微量样品作大倍数稀释和分液(partitioning),直至每个样品中所含有的待测分子数不会超过1个,再将所有样品在相同条件下进行PCR扩增,并对发生了扩增反应的样品逐个进行计数的一种技术。特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
有了数字PCR,在定量pcr时,我们就不用再考虑究竟是相对定量还是**定量?尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而dPCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的**定量。
由于OpenArray平板的开放特性,数字PCR反应重复的数量可轻松调整,以满足应用需求。它既可运行单个子阵,也可运行全部四块平板。对于低精度的应用,您可以增加样品通量,降低成本,而对于高精度应用,您又可以提高重复的数量,让平台性能大化。这种灵活性可轻松实现,又不折损性能。
dPCR技术继续发展,形成了ddPCR技术。这就是QuantaLife公司开发出的微滴数字PCR技术。该产品还获得了2011年度Frost & Sullivan北美新产品**奖。2011年10月,Bio-Rad公司收购了QuantaLife和ddPCR技术,推出了QX100微滴式数字PCR系统。
具体信息请参加技术文档》》(生物帮bio1000.com)