一步法RT-ddpcr试剂盒(one-step RT-ddPCR kit for probes)的试剂盒让研究人员能够**灵敏地测定目标RNA分子，应用于基因表达分析、miRNA分析和病毒载量定量等方面。与通常的逆转录之后再对cDNA进行分液不同，如今是先分RNA，再开展逆转录和PCR，一切都在液滴中进行，这减少了手动操作，降低了污染的可能性。
此试剂盒将逆转录反应与微滴式数字PCR结合起来，为RNA的**定量创造了一个新典范。研究人员可将一步法RT-ddPCR试剂盒与QX100微滴式数字PCR系统结合使用，测定目标RNA拷贝数的微小差异，而在这之前，定量pcr是无法测定的。
它是如何工作的?
一步法RT-ddPCR试剂盒遵循ddPCR流程，只是它的分液对象不是DNA，而是RNA。样品被分成20,000个微滴，而目标和背景RNA被随机分布。在逆转录之后，生成的cDNA被pcr扩增，以便检测目标。每个微滴都带来了一个阳性或阴性的荧光信号，指示目标RNA存在与否。采用微滴分析仪(droplet reader)逐个对每个微滴进行检测，而软件计算出每微升样品中目标RNA的浓度。
与QX100微滴式数字PCR系统联合使用，一步法RT-ddPCR试剂盒让研究人员能够：
•富集稀有的目标RNA序列
•检测基因表达水平的微小差异
•无需标准曲线，确定RNA分子的拷贝数
与传统的微流体数字PCR平台不同，Bio-Rad公司的QX100微滴式数字PCR系统先对样品进行微滴化处理。这样的好处是每个样品可形成20,000个液滴，而其他系统只能分成760-3,000个部分。分得越多，则意味着分析越准确。
