离心机是利用离心力对混合液(含有固形物)进行分离和沉淀的一种专用仪器。实验室常用电动低速离心机有低速、高速离心机和低速、高速冷冻离心机,以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。其中以低速(包括大容量)离心机和高速冷冻离心机应用为广泛,是生化实验室用来分离制备生物大分子必不可少的重要工具。在实验过程中,欲使沉淀与母液分开,常使用过滤和离心两种方法。
但在下述情况下,使用离心方法效果较好。
沉淀有粘性或母液粘稠。
沉淀颗粒小,容易透过滤纸。
沉淀量过多而疏松。
沉淀量很少,需要定量测定。或母液量很少,分离时应减少损失。
沉淀和母液必须迅速分开。
一般胶体溶液。
电动低速离心机的基本结构和性能
普通(非冷冻)离心机
这类低速离心机结构较简单,可分小型台式和落地式两类,配有驱动电机、调速器、定时器等装置,操作方便。低速离心机其转速一般不超过4000rpm,台式高速离心机大转速可达18000rpm。平稳、缓慢地转动调速手柄(约需1~2分钟)至所需转速,待转速稳定后再开始计时。离心完毕,将手柄慢慢地调回零位。
低速冷冻离心机
转速一般不超过4000rpm,大容量为2—4L,是实验室常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。速冷冻离心机这类离心机多用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及**沉淀物等。转速可达20000rpm以上,除具有低速冷冻离心机性能和结构外,高速离心机所用角式转头均用钛合金和铝合金制成。离心管为具盖聚乙烯硬塑料制品。此外,超速离心机还装配有抽真空系统。
超速低速离心机
转速可达50000rpm以上,能使亚细胞器分级分离,并用于蛋白质、核酸分子量的测定等。其转头为高强度钛合金制成,可根据需要更换不同容量和不同型号的转速转头。超速离心机驱动电机有两种,一种为调频电机直接升速,另一种为通过变速齿轮箱升速。为了防止驱动电机在高速运转中产热,装有冷却驱动电机系统(风冷、水冷),限速器、记时器、转速记录器等关闭开关。切断电源。
使用方法检查低速离心机调速旋钮是否处在零位,外套管是否完整无损和垫有橡皮垫。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种,离心管有硬质玻璃、聚乙烯硬塑料和不锈钢管多种型号。
离心机装配有驱动电机、定时器、调整器(速度指示)和制冷系统(温度可调范围为-20—40℃),可根据离心物质所需,更换不同容量和不同型号转速的转头。
低速离心机的一般使用规程待离心机自行停止转动手,才可打开机盖,取出离心样品。将外套管、橡胶垫冲洗干净,倒置干燥备用。如不平衡,可调整缓冲用水或离心物质的量。将平衡好的套管放在离心机十字转头的对称位置上。把不用的套管取出,并盖好离心机盖。离心前,先将离心的物质转移入合适的离心管中,其量以距离心管口1~2cm为宜,以免在离心时甩出。将离心管放入外套管中,在外套管与离心管间注入缓冲水,使离心管不易破损。取一对外套管(内已有离心管)放在台秤上平衡。接通电源,开启开关。一年检查一次电动机的电刷及轴承磨损情况,必要时更换电刷或轴承。注意电刷型号必须相同。更换时要清洗刷盒及整流子表面污物。
二硫化钼锂基脂润滑。加量一般为轴承空隙的1/2低速离心机要放在平坦和结实的地面或实验台上,不允许倾斜。
注意事项新电刷要自由落入刷盒内。要求电刷与整流子外圆吻合。轴承缺油或有污物时,应清洗加油,轴承采用须平稳、缓慢增减转速。关闭电源后,要等候离心机自动停止。不允许用手或其他物件迫使离心机停转。
离心机应接地线,以确保**。离心机启动后,如有不正常的噪音及振动时,可能离心管破碎或相对位置上的两管重量不平衡,应立即关机处理。