科学的探索是永远无止境的。Qiagen在已经拥有了SuperFect、Effectene和PolyFect这三种DNA转染试剂之后,还在不断研究开发新技术,希望对转染效率和毒性进行改进。近,Qiagen公司就新推出两种DNA转染试剂——NanoFect和Attractene。另外,QIAGEN还推出了转染大挑战的活动,有没有胆量来尝试一下?
NanoFect 是纳米级颗粒分子,不含脂类分子、内**及任何动物来源的成分。当它与DNA混合时,形成纳米大小的转染复合物。这种技术能够高效转染多种细胞类型,包括 Hela、NIH/3T3、Caco-2、293、COS-7和MCF-7等。由于它不含脂类分子,所以特别适合于研究脂类分子的实验、信号转导研究及制药公司**筛选时用NanoFect做载体的应用。这对研究动物模型的研究者来说也是一个福音,因为市场上可以用于体内转染的试剂很少。转染步骤也很简单,当天就可以完成。对于24孔板,每次的用量约为2ul。
Attractene 转染试剂是一种非脂质体的脂质分子,它能够高效转染各种贴壁细胞,包括难转染的细胞如HaCaT、MonoMac6和HCT116,也可以用于悬浮细胞。经过全球多个国家的客户试用,大部分反映转染效果类似或优于他们目前正在使用的转染试剂,而且普遍反映其毒性更小。一个成功的转染实验的关键因素是看转染试剂没有细胞毒性。如果对细胞的毒性太大,基因表达的模式可能改变,结果会变得不可靠。如果你现在正面临转染效率不高或毒性太大,不妨试一下 Attractene。而且它的转染步骤经过改进,是一种“快进”模式,接种和转染可以在当天进行,更节省时间。Attractene转染试剂适合于瞬时转染、稳定转染及不同DNA的共转染,还可以用于shrna载体的高效转染。它的规格有三种:0.5ml、1ml和4×1ml,每次用量约为 1.5ul(24孔板)。这两种试剂都是新上市,所以价格暂时没查到。
另外,Qiagen还新推出了转染步骤数据库。你可以通过这个数据库找到适合你的细胞系和培养板/皿大小的转染试剂和专门步骤。点击http://www1.qiagen.com/transfectionprotocols/,输入细胞系、核酸类型(DNA、mRNA、miRNA或sirna)、培养形式(6孔板或其他),就会弹出Qiagen推荐的转染试剂,和专门的转染步骤,你可以下载或打印,非常方便。这样可省事多了,你再也不用从几个方面去优化条件,还能节约样品和试剂。
到目前为止,Qiagen的转染大家族包括三大转染技术和7种转染试剂。按技术分类:
活化的树状聚合物
◆ SuperFect:大多数细胞系的DNA转染
◆ PolyFect:COS-7, NIH/3T3, HeLa, 293和 CHO 五大细胞系的DNA转染
非脂质体的脂质分子
◆ Effectene:广泛细胞系的DNA转染,特别针对原代细胞和敏感细胞转染有效
◆ Attractene:各种贴壁细胞(包括难转染的细胞)的DNA转染
◆ TransMessenger:真核细胞mRNA转染或质粒DNA与siRNA 的共转染,对于多种神经细胞效果更好
◆ HiperFect:siRNA的真核细胞转染,特别适合低浓度siRNA转染(现在订购siRNA还能免费送HiperFect,请看特价专栏)
纳米聚合物
◆ Nanopolymer:不含脂类、100%无动物来源,真核细胞的高效DNA转染,可用于特殊的应用