对任何DNA探针测定来说,杂交反应包括四个基本要素:exiqon探针、靶物质(样品中的待测核酸)、检验方法(根据采用的标记物或报告基因而定)和杂交模式。核酸分子杂交可分为液相杂交和固相杂交。
1.液相杂交
液相杂交是让exiqon探针和待测核酸在溶液中进行反应。在溶液中,待测核酸和探针均自由运动,增加了两者结合的机会,因此液相杂交要比固相杂交快5~10倍。但液相杂交不易分离杂交体和游离核酸探针,常规应用不易。
2.固相杂交
固相杂交是先将待测核酸样本结合到固相载体上,再与溶于溶液中的检测杂交信号后分析杂交结果。
固相杂的基本程序是:①准备待测样本;②制备和标记探针;③固相载体的处理;④预杂交、杂交、漂洗;⑤杂交信号检测;⑥结果判断及分析。
常用的固相杂交方法有斑点杂交法、夹心杂交法和原位杂交法等。
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