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全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务

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  • 产品名称:全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务
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简单介绍
世界**品牌全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
产品描述
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关键词:全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务
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全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:全长鸟枪法测序技术服务|实验技术服务 http://www.ybiotechmall.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
基因测序的方法 是在获得一定的遗传及物理图谱信息的基础上,绕过bac克隆逐个排序的过程,将基因组dna分解成2kb左右的小片段进行随机测序,辅以一定数量的10kb的克隆和bac克隆的末端测序,利用超级计算机进行整合进行序列组装。
系将大片段DNA(如噬菌体文库中约40 kb长或**人工染色体所含350 kb长的DNA插入片段)随机切成许多1~1.5 kb的小片段,分别对其测序,然后借助序列重叠区域拼接成全段序列。
优点是速度快,简单易行,成本较低。但用它来测序,终排序结果的拼接组装不太容易。
全基因组鸟枪法测序的主要步骤是:
**,建立高度随机、插入片段大小为1.6kb到4kb左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量,即经过两端测序的克隆片段的碱基总数应达到基因组大小的6到10倍。
**,高效、大规模的克隆双向测序。
第三,序列组装。借助Phred, Phrap, Consed 软件进行序列组装,产生一定数量的contig。
第四,填补缺口。有两种待填补的缺口,一是没有相应模板DNA的物理缺口,我们通过PCR的方法进行填补;二是有模板DNA但未测到的序列缺口,我们直接在模板DNA上设计引物测序。
鸟枪法测序适用范围:BAC、Fosmid、cosmid、线粒体DNA、叶绿体DNA等。
大致步骤
1.使用限制性内切酶将带有目的基因的DNA链切成若干小段。
2.再使用DNA连接酶将其整合到载体的基因中,并使其表达。
3.如果在某个细胞中得到了目的产物,就说明整合到该细胞中的DNA片段就是所需要的DNA片段。
鸟枪法测序的缺点
随着所测基因组总量增大,所需测序的片段大量增加,各个片段重叠或一个连续体的概率是2n2-2n
高等真核生物(如人类)基因组中有大量重复序列,导致判断失误。

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