无菌室的建设装修要求
一般是在微生物实验室内专辟一个小房间,可以用板材和玻璃建造,面积不宜过大4~5m2即可,高2.5m左右;无菌室的设计可因地制宜,但应具备下列基本条件:室内的地面、墙壁须平整,不易藏污纳垢,便于清洗;要求严密、避光,隔板以用玻璃为佳,但为了在使用后排湿通风,应在顶部设立百叶排气窗,窗口加密封盖板,可以启闭,也可在窗口用数层纱布和棉花蒙罩,侧面底部应设进气孔,*好能通入过滤的无菌空气。无菌室一般应有里外两间,较小的外间为缓冲间,以提高隔离效果,应安装拉门,以减少空气流动,必要时在向外一侧的玻璃隔板上安装一个双层的小型玻璃橱窗,便于内外传递物品,减少进出无菌室的次数。室外要设一个缓冲间,缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向,以免气流带进杂菌,无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备须有空气过滤装置,室内应有照明、电热和动力用的电源;工作台台面应抗热、抗腐蚀,便于清洗**;可采用橡胶板或塑料板铺数台面,工作台的台面应该处于水平状态,无菌室和缓冲间都装有紫外线灯,和紫外线灯距离工作台面1m。无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在20~24℃,湿度保持在45%~60%,超净台洁净度应达到100级;无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染,严防一切**器材和培养基污染,已污染者应停止使用;室内应备有工作浓度的**液。
应定期用适宜的**清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求,需要带入无菌室使用的仪器、器械、平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法**。工作人员进入前,须用肥皂或**液洗手**,然后在缓冲间更换专用的工作服、鞋、帽子、口罩和手套(或用70%的酒精再次擦拭双手),方可进入进行操作。无菌室使用前须打开紫外灯辐照**30min以上,并且同时打开超净台进行吹风,操作完毕,应及时清理,再用紫外灯辐照**20min。供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染,检查前用70%的酒精棉球**外表面,每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。无菌室应每月检查菌落数,在超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15mL,放至凝固后,倒置于30~35℃培养箱培养48h,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30min后,倒置于30~35℃培养箱培养48h,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级洁净室平均不得超过3个菌落,如超过限度,应进行彻底**,直至重复检查合乎要求为止。