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ELISA试剂盒细胞裂解液和组织匀浆液的细节处理

发布时间:2018-05-24

ELISA试剂盒细胞裂解液和组织匀浆液的细节处理

因为酶免ELISA试剂盒只能查看可溶性蛋白的含量,所以应保证一切样本均为澄清的液体,沉积或悬浮物都应离心
去掉。为了保证查看的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本*好在1~6个月内查看;4℃保存的样本应在1周内进
行查看。别的,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会按捺HRP的活性,然后致使假阴性的成果。  
一、ELISA试剂盒细胞裂解液的细节处理:  
1. 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加恰当培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省掉。  
2. 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。  
3. 参与恰当的预冷PBS或细胞裂解液(临用前参与蛋白酶按捺剂)重悬细胞。一般6孔板一个孔的细胞量需求150~
250μL PBS重悬。  
4. 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温冻住样品,重复冻融几回,使细胞充分裂解。也可将样品进
行超声破碎,以抵达裂解的目的。  
5. 4℃10000×g离心10min,除掉细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。 
二、酶免ELISA试剂盒组织匀浆液的细节处理:
1. 将组织样本用PBS(0.01M, PH 7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2. 将组织块称重,记载后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3. 将组织按必定的比例参与预冷的PBS(临用前参与蛋白酶按捺剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。
4. 罗致匀浆液到离心管,4℃5000×g离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。

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