ELISA小能手解析----干扰素(IFN)
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干扰素(IFN)是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和**细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节**功能等多种生物活性。
干扰素不能直接灭活病毒,而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白(AVP)发挥效应。干扰素首先作用于细胞的干扰素受体,经信号转导等一系列生化过程,激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白,实现对病毒的抑制作用。
干扰素的化学本质是糖蛋白,有α、β、γ、δ、ε、ζ、κ、τ、ω、λ等类,每一类又包含很多种(也许几十种),它们可以被归入Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型。其中INF-α、β、ω、ζ、κ、τ、δ、ε可归为Ⅰ型,IFN-γ是Ⅱ型干扰素,新世纪发现的IFN-λ则是Ⅲ型干扰素,并不是每一种干扰素都能在人体中找到,也由于它的分型分类实在太多了,所以这里也不可能一一介绍每一种的功能。
Ⅰ型为皇室直系。Ⅰ型IFN(主要为α/β IFN)在机体控制病毒感染方面发挥重要作用。IFN-α主要由单核-巨噬细胞产生,此外B细胞和成纤维细胞也能合成IFN-α;IFN-β主要由成纤维细胞产生。IFN-α/β二者结合相同受体,分布广泛,包括单核-巨噬细胞、多形核白细胞、B细胞、T细胞、血小板、上皮细胞、内皮细胞与肿瘤细胞等。
IFN-α/β有许多相似之处:
① 两种IFN基因来自同一个祖先基因(common ancester gene);
② 由相同的细胞在相同的刺激物诱导下产生;
③ 结合相同的受体,并发挥相似的生物学效应。
IFN-α/β的生物学作用:
① 抗病毒作用:IFN-α/β具有广谱的抗病毒作用。
② 抑制某些细胞的生长(cytostatic),如抑制成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞和造血细胞的增殖,其机理可能通过使细胞停留在Go/G1期,降低DNA合成,下调c-myc、c-fos等细胞原癌基因转录水平,下调某些生长因子受体表达,如EGf R、胰岛素-I R和M-CSFR等。
③ **调节作用:促进大多数细胞MHCⅠ类抗原的表达,活化NK细胞和CTL。
④ 抑制和杀伤肿瘤细胞:IFN-α/β杀伤肿瘤细胞主要是通过促进机体**功能,提高巨噬细胞、NK和CTL的杀伤水平。
Ⅱ型干扰素即γ干扰素,主要由活化的T细胞(包括Th0、TH1细胞和几乎所有的CD8+ T细胞)和NK细胞产生,是所谓的**因子(LyTnPhokine)的一种。IFN-γ可以以细胞外基质相连的形式存在,故通过旁邻方式控制细胞生长,其可以分布在除成熟红细胞以外的几乎所有细胞表面。
IFN-γ的生物学活性
(IFN-γ生物学作用有较严格的种属特异性,人IFN-γ只作用于人或灵长类动物的细胞)
① 诱导单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、皮肤成纤维细胞、血管内皮细胞、星状细胞等MHCⅡ类抗原的表达,使其参与抗原提呈和特异性**的识别过程。此外,IFN-γ可上调内皮细胞ICAM-1(CD54)表达,促进巨噬细胞FcγR表达,协同诱导TNF并促进巨噬细胞杀伤病原微生物。
② 促进LPS体外刺激小鼠B细胞分泌和IgG2a,降低IgG1、IgG2b、IgG3和IgE的产生;���制由IL-4诱导小鼠B细胞增殖,IgG1和IgE产生以及FcεRⅡ表达;促进SAC诱导的人B细胞的增殖。
③ 协同IL-2诱导LAK活性,促进T细胞IL-2R表达。
④ 诱导急性期蛋白合成,诱导髓样细胞分化。
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IFN-λ,即Ⅲ型IFN,是一类新发现的细胞因子,由IFN-λ1(IL-29)、IFN-λ2(IL-28A)和IFN-λ3(IL-28B)三个亚型组成。IFN-λ具有不同于Ⅰ型IFN的基因、结构及特异性受体,但具有与Ⅰ型IFN相类似的抗病毒、抗肿瘤和**调节效应。
作为广谱的抗病毒活性和**调节功能的干扰素,它们的抗病毒特点:
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干扰素属于诱生蛋白,正常细胞一般不自发产生干扰素,在受诱生剂(如病毒、**和某些化学合成物质)激发后,干扰素基因去抑制而表达;
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干扰素系统是发挥作用*快的**病毒防御体系,可在很短时间(几分钟内)使机体处于抗病毒状态,并且机体在1~ 3 周内对病毒的重复感染有抵抗作用;
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干扰素的抗病毒效应是通过与靶细胞受体结合,诱导抗病毒蛋白( AVP)表达,从而抑制病毒,但是并不杀病毒;
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干扰素具有种属特异性,并且不同病毒、不同细胞对干扰素敏感性不同;Ⅰ型和Ⅱ型干扰素发挥不同效应,不能相互替代。
由于干扰素的广谱抗病毒作用,如今基因工程制造的干扰素已经成为人类抵抗病毒战争的重要武器。并且也正是因为它的这些功能,干扰素在不同生物,乃至在同种生物都具有巨大的多样性。
1.ELISA产品种类丰富:已上线3600种,有普通、高敏两个系列,覆盖15个研究领域;
2.样本量少:人、大鼠样本量需50uL,小鼠只需10uL;
3.操作时间短:*快2h完成孵育;
4.严格质控:精密度(板间、板内变异系数)准确度(回收率、稀释线性)样本值等8项质控指标检测;
5.发表的SCI文章数不胜数,*高影响因子可达15.84。