原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。原代细胞在培养的过程中，也可能产生基因突变而形成无限传代的细胞株，传代次数越多，就越有可能变成细胞株（基因缺陷型），因此科学界也通常把**代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。
原代细胞培养实验室常规步骤为：
1）将动物组织从机体中取出并**除去存留在组织上的**、病毒、**等污染源，这些污染源将会所需培养的原代细胞凋亡、停止生长和繁殖直至死亡，因此整个原代细胞培养过程中**在无菌状态下进行。
2）将组织块在选定的蛋白酶溶液中浸泡20-30分钟，通常在37C水浴里进行，而蛋白酶的选定取决于器官组织和所需细胞的类型，比如成骨、肌肉、心、肝等就需要用胰蛋白酶才能分解而出单个细胞，但是对于脑组织和乳腺等软组织，就只能用分解能力较弱的胶原蛋白酶， 以免损伤分散出来的单个细胞。
3）将分散而成的单个细胞置于合适的培养基（含有特殊细胞生长因子、添加剂以及血清， 或者无血清培养基）中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖， 整个过程都是在无菌情况下操作。
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