怎样才能选到合适的酶标板
一:依据酶标板与蛋白和其它分子结合才能的不同,分为高结合力、中结合力和氨基化
高结合力:外表经处理后,其蛋白结合才能大大增强,可达300~400ngIgG/cm2,首要结合的蛋白分子量>10kD。
运用该类酶标板可进步敏感性,并可相对削减包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易发作非特异性反响。抗原或抗
体包被后,以非离子去污剂无法有效地关闭未结合蛋白的部位,需运用蛋白作为关闭剂。
中结合力:经外表疏水键被迫与蛋白结合,合适作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合才能为
200~300ng IgG/cm2。该类板能够慵懒蛋白或非离子去污剂作为关闭液。
氨基化:经外表改性处理后具有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代。该类酶标板合适作为小分子蛋白的固相
载体。运用合适的缓冲液和pH值,其外表可经过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其外表的亲水特性和可经过
其它交联剂共价结合的才能,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺点为由于
降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其外表需有效地关闭。由于亲水和共价的外表特性,运用的关闭液
必须能够与非反响性氨基基团和所挑选的交联剂中任何功用基团发作效果。
二:依据酶标板底部的不同,能够分为平底、U型底、V型底
平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,便利加样、吸样、混匀等操作,能够不用放在
酶标仪上,直接经过目测观察色彩改变情况,然后断定有无相应的**反响。V底的酶标板能够准确的汲取样品。
三:依据色彩分为通明、黑色、白色
通明的是*常用的,用于*一般的酶联**试验。相对于通明的的板子,还有用于发光检测用的不通明的板子,一
般有黑色和白色两种。黑色的酶标板本身会有光吸收,所以它的信号相对于白色的板子要低许多,因而一般用于检
测较强的光,如荧光检测。而白色的酶标板就用于较弱的光检测,常用于一般的化学发光。别的黑色的酶标板还能
够消弱非特异反响带来的问题。有些客户会问,用一般的酶标板可不能够进行发光检测,回答是不能够的,由于一般
从化学发光反响中发射出的光是各向同性的,也就是说各个方向上平等发射出来的。如果用通明的板子,光不只会从
垂直方向发散,还从水平方向发散出来。很容易的就会经过各个孔之间的空隙和孔壁。这样的话,光较强时相邻孔之
间的影响就会很大,因而不能用通明的酶标板来进行化学发光试验。当然,现在的酶标板还有可拆开和不行拆开供客