ELISA试剂盒实用小窍门,值得看看!
1. 标本及收集、贮运要素
① 严峻溶血:以HRP为标记的ELISA测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色构成假阳性;
② 混有红细胞的血清易沉积或附着在聚乙烯孔内不易洗净
③ 如有**污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会发生假阳性反响;
④ 标本凝结不全,有时为了争取时刻快速检测,常在血液还未开端凝结时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以构成肉眼可见的纤维蛋白块,易构成假阳性成果;
⑤ 采血试管洗刷不完全、重复运用易穿插污染
⑥ 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降构成假阴性。
血清标本宜在新鲜时检测,严峻溶血标本禁用。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时刻过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻住血清融解后,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充沛混匀并避免发生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。重复冻融会使 抗体 效价下跌,所以测 抗体 的血清标本如需保存作屡次检测,宜少数分装冰存。
2. 之操作技术的影响
① 应确保清洁,整个操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸。以上的办法可以使“花板”降至限度。然后提高检测的特异性。并得到更**、可靠的试验成果。
② 合理安排检丈量,避免反响板过多构成洗板等候时刻长。
③ 加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
④ 用洗板机洗板时,确保洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(挑选干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要避免针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易发生拖带现象而导致“花板”的呈现。
⑤ 显色剂尽量在临用前制造,坚持不必过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必。
希望以上的ELISA试剂盒试验有用小窍门可以给您带来实质上的协助,更多相关试剂盒的材料概况欢迎您。