转换生长因子的样本处理及保存方法
转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是属于一组新近发现的调节细胞生长和分化的TGF-β超家族。生物样品中的TGF-β通常以无活性的形式存在。在检测TGF-β活性前必须活化以释放TGF-β的活性。活化的方法主要有两种:加热活化和酸化活化。
加热活化:在TGF-β样品中加入BSA到终浓度50~100μg/ml,将微量离心管置80℃水浴中8分钟活化TGF-β,置冰上冷却5分钟后检测活性。
酸化活化:用5N HCl将TGF-β样品的pH调节到2.0~2.5,室温放置10分钟活化TGF-β;再用5N NaOH(1mol/L pH7.4 Hepes缓冲液配制)将pH调节到pH7.5。