人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞

人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞

货号 KL-007
简称 COC1/DDP
细胞数 1×10⁶
规格 1ml/T25
价格 询价
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物**台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。
详细描述 Description
人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞 
细胞介绍
 COC1/DDP细胞是陈惠桢教授等用**剂量增选法筛选获得的COC1细胞耐药亚株。COC1/DDP对顺铂（DDP 1μg/ml）的耐受性是亲本株（COC1细胞）的6.5倍，同时，对卡铂（CBD-CA），丝裂霉素C（MMC）也具有不同程度的交叉耐受性。可用于卵巢肿瘤**的体外试验研究。 
 
细胞特性
1）  来源：卵巢癌
2）  形态：**母细胞样，贴壁生长
3）  含量：>1x10⁶ 个/mL
4）  污染：支原体、**、酵母和**检测为阴性
5）  规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞 
细胞用途：仅供科研使用。
                      
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
注意：客户收到细胞后按照下面的要求操作：培养瓶里面的培养液是不含**的。待细胞长到 70-80%的汇合度时，去掉培养液，加入含 500ng/ml DDP**的培养液，放入培养箱，这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来，但是不要紧，通过换液可以去掉，下面的细胞待长满就可以消化传瓶了，这时可以一直用含药培养液来消化培养细胞，一两代之后可以将**浓度提高到 800ng/ml，含药培养液用于细胞培养都没问题的，冻存的时候就不要在冻存液里面加**了。
1） 人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；上等胎牛血清，10%，添加PS，1%，800ng/ml DDP。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。**天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.      弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.      加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.      按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.      将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
人卵巢癌细胞COC0耐药亚株，对顺铂耐药细胞 
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物**台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。