DU 145(人前列腺癌细胞)
细胞名称:DU 145 人前列腺癌细胞
组织来源:前列腺;转移灶,脑癌
培养条件:MEM +10% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:DU 145是从一位有3年**细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到**敏感性,酸性磷酸酶阳性,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。
DU 145(人前列腺癌细胞)操作说明:
1)对于常温运输的细胞,收到细胞后,检查是否有运输问题,即细胞培养瓶或管是否破损,细胞培养液是否溢出。若没有运输问题,请75%酒精**后,保留封口膜,放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数:温度,湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后,细胞状态稳定后,即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系,DU 145(人前列腺癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许,培养的前三天内做细胞拍照记录,通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。
2)对于干冰运输的细胞,请取出冷冻管后,须立即放入37C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。然后将其复苏培养,次日更换培养液。
DU 145(人前列腺癌细胞)注意事项:
1)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
2)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
3)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
DU 145(人前列腺癌细胞)下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染:
一)杆菌污染:培养基中加入***可以减少此种污染,但也不是**的。
二)支原体污染:传说中的黑焦虫,长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。
三)***污染:似乎无处不在,而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上,高倍镜下呈树枝状或葡萄状。
四)霉菌污染、比较常见的一种污染,常常来源于污染的空气、水和器械。