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产品详情

OCI-LY10细胞培养基

  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:OCI-LY10细胞培养基
  • 产品型号:K-H381
  • 产品展商:美国ATCC
  • 产品文档:无相关文档
  • 发布时间:2016-12-08
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简单介绍
OCI-LY10细胞培养基依据传代比例,将细胞悬液分瓶,再补充培养基后,静置于温箱培养,直止贴壁。 细胞名称:OCI-LY10 弥漫大B细胞**瘤细胞 组织来源:B**细胞 培养条件:1640 +10% FBS 形  态:悬浮;**母细胞样 OCI-LY10细胞培养基对应的培养基6mL(T25培养瓶)或12mL(T75培养瓶)终止消化。
产品描述

OCI-LY10细胞培养基

细胞名称:OCI-LY10     弥漫大B细胞**瘤细胞
组织来源:B**细胞
培养条件:1640 +10% FBS 
形  态:悬浮;**母细胞样

OCI-LY10细胞培养基传代操作:

       1.吸除培养瓶内旧培养液。
       2.加入无菌pbs洗液(5-8mL)轻轻润湿细胞,稀释多余的培养基,之后吸走洗液,动作要轻,不可吹打到细胞。
       3.向瓶内加入含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少许,以能覆满瓶底为限。 
       4.置温箱中2~5分钟,一旦镜检发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,细胞变圆,比较松动后,立即终止消化。
       5.加入该细胞对应的培养基6mL(T25培养瓶)或12mL(T75培养瓶)终止消化。
       6.用吸管通过吸取的培养基轻轻反复吹打瓶壁细胞,OCI-LY10细胞培养基使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时应尽量以*少的次数将细胞从壁上吹下,不仅要控制吹打的力度、次数,还要注意要将细胞尽可能吹成单个。这样既能减少死细胞,又能便于细胞再次均匀贴壁生长。
       7.依据传代比例,将细胞悬液分瓶,再补充培养基后,静置于温箱培养,直止贴壁。
        贴壁细胞在培养瓶长成致密单层后,继续生长的空间不足,培养基中的营养成份也消耗较多,同时代谢废物也有较多堆积,需要分瓶培养,对细胞进行传代扩增。对于贴壁不太紧的细胞如293,可以直接吹散后分瓶。而对于贴壁较紧的细胞如CHO,则需要以胰酶消化后再吹散分瓶。以笔者的经验,以轻吹或加培养液后轻摇可下较好,但对于经验不太充分的实验者而言是较难判断掌握的。
对于悬浮细胞换液时只需要补液就行。
        悬浮细胞的传代则不需要用胰酶消化,OCI-LY10细胞培养基直接通过计数算好传代的比例,直接分瓶,补液。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,避免吹打。典型实例:jurkat就是成团生长。当jurkat细胞密度比较大时,可将培养瓶竖直放置2分钟左右,待大部分细胞沉下,吸走上层清液,补充等量的新鲜培养基。而HL-60就不一样了,为悬浮单个生长,如果发现该细胞包团,说明细胞状态不好,不加以正确的处理,*终会发生凋亡。
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