NK细胞不是一类同源的细胞群体,根据功能和表型可以分为几个亚类。CD56+CD8+/CD8-NK分选试剂盒可以用来富集两种NK细胞:CD3-CD56+CD8+和CD3-CD56+CD8-NK细胞。CD3-CD56+CD8+NK细胞大约占健康供体外周血单个核细胞的3%,CD3-CD56+CD8-NK细胞则占4%。这两类NK细胞在由两条α链形成的CD8同源二聚体的存在上是不同的。目前认为,CD8α/α在CD3-NK细胞中表达是一个非常重要的特征,因为CD3-CD56+CD8+亚类相对于CD8-亚类而言具有很强的细胞毒性1。
CD56+CD8+和CD56+CD8-NK细胞亚类的分选都是通过两步法进行的。在分离过程中,非NK细胞,例如T细胞、B细胞、树突状细胞、干细胞、单核细胞、粒细胞以及红细胞首先被生物素偶联的抗系别特异性抗原的抗体和抗生物素的微珠间接标记。随后采用置于MACS分离器的MACS®分离柱进行细胞的磁性分离,磁性标记的非NK细胞被滞留在分选柱中,而非标记的NK细胞流出。在**步分离中,使用CD8微珠直接磁性标记预富集的NK细胞。随后非标记的CD56+CD8-NK细胞(LD柱)或标记的CD56+CD8+NK细胞(MS柱)被分离。为了从一个样品中分离两个亚类,MS柱流出部分可以采用LD柱进行进一步分离。
应用:CD56+CD8+/CD8-NK细胞分选试剂盒用来从外周血单个核细胞中分离CD56+CD8+以及CD56+CD8-NK细胞,以用于NK细胞亚类的表型和功能鉴定、受体表达的分析、细胞因子的分泌以及在固有和获得性**反应中的细胞间相互作用分析。分离的NK细胞也用来研究NK细胞在**中的作用,例如肝炎感染、癌症以及其在怀孕中的作用。
分选柱 **次磁性分选(去除):LD 或autoMACSTM柱 随后的CD56+CD8+NK细胞的阳性筛选:MS或autoMACS柱 CD56+CD8-的分选:LD或autoMACS柱