ELISA试剂盒实验前应做哪些准备
1、仔细阅读说明书,确定试剂盒在有效期内。
2、按说明书确定所有试剂是否齐全,完整的Sunny ELISA检测试剂盒包含预包被酶标板,检测抗体、链霉亲合素标记的HRP、标准品、标准品稀释液、TMB显色液、终止液、洗液等10个组分,另外要确认试剂盒以外的材料是否齐全,如酶标仪、移液器及枪头、加样槽、离心管、量筒、蒸馏水、稀释用聚丙烯试管等。
3、实验前,将试剂盒从冰箱中取出,室温放置半个小时,以让试剂恢复到室温。
4、将10×的检测缓冲液(Assay Buffer)稀释到1×,吸取10X浓缩Assay buffer 5mL至50mL离心管,加蒸馏水至 50Ml,震荡混匀备用。
ELISA试剂盒实验结果分析:
一、孵育完毕后取出微孔板,如果采用水浴法,用吸水纸吸干外壁的水分。
二、在微孔后面放置一张白纸并观察孔内的颜色变化,从微孔壁侧面所能观察的颜色比从顶部或者底部所能观察到的更准确。
三、有时候孵育时在微孔侧旁会出现气泡,可以在没有气泡的另一侧进行观察,对于一些颜色介于阴性和阳性质控的样品,需要进行更进一步的分析和重测。
四、试剂的准备孔板(条或孔)和阳性和阴性质控临用前取出,应在室温下放置至少半小时,不使用的微孔板应置于2-8°C保存,剩余的阳性和阴性质控应放回原处冰冻保存。