为什么同一批次提取蛋白跑出的条带不一致
在做蛋白提取实验中,也许有的同学都会提出这样的疑问:每次提蛋白后会将样品在短时间内重复2-3次WB,但是每次跑出的条带趋势不一致,上样量和其他条件都没有变,内参基本是整齐稳定的,不知道为什么目的条带就是不一致?这是什么原因呢?
影响因素太多了,实验中的任何任何一个步骤稍微有点差异都能产生不同的结果,下面简单说三点,可以用作参考。
1.你蛋白的问题,虽然是同一批的,但是可能在蛋白表达与纯化过程中难免会出现个别的异类;
2.你的操作流程,不管做什么都会有误差,不可能每次的做的都一样,我们只能减少误差,所以可能你觉得自己每次都做得一样,但某个小细节你并没有发现;
3.试剂,也许你的试剂已经不能用了,或者溶度不对了都会影响你的实验。
做一个实验来说**原则就是精准,也许你这次做出来了下次就做不出来了,每次做的时候写下来,不要嫌麻烦,这样做错了能省很多时间。