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ELISA酶联**吸附,间接法测定抗体的问题

发布时间:2018-01-04

ELISA酶联**吸附,间接法测定抗体的问题

ELISA酶联**吸附,间接法测定抗体,为何不能直接将待测抗体直接用酶标记,然后直接加底物。而要加酶标抗抗体。

1:待测抗体一般是**后产生的抗体,其中有**失败和抗体过少等因素存在,用酶标记有许多不确定性,如用酶标记前期有测不出效价的可能,造成不必要的困惑。
2:ELISA酶联**中酶标抗抗体和抗体结合后有巨大的信号放大作用,可以将信号扩大千倍以上,适合于较低抗体量的测定。
3:筛出单抗后可以考虑直接酶标抗体,不过在确定测定体系上要费不少功夫。

如果将酶标记到待测抗体上,相对经典的间接法更加繁琐,而且你在 摸索标记条件时不能保证操作失误导致待测抗体失活;酶标二抗现在是已经商品化了的,被大规模生产,购买后使用方便。如果你的间接做的好的话,方法被优化了后,一抗二抗显色,总共的时间加起来,出结果不会超过2-3小时。
其实你的意思就是减少反应步骤,节约反应时间。可以用直接ELISA法,就是用抗体包板,在抗原上标记酶,然后显色,这样与间接法相比就减少了一步,缩短了时间。
但是,直接法和间接法,他们各有优缺点,要根据你的具体要求而定了。

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