ELISA试剂盒注意事项和操作过程

ELISA试剂盒注意事项和操作过程

ELISA试剂盒注意事项
1.  此试剂为体外检测试剂，效期内运用，试剂应视为感染物，不同总批号的试剂不能混用。
2．运用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3．浓缩洗刷液呈现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4．浓缩样品稀释液呈现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5．若24小时内进行试验，标本可存放于2～8℃。不需及时试验，标本-20℃保存，防止反复冻融。
6．在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将下降**度，造成吸光度违背的假像。
7．加样结束后，应注意细微摇摆微孔反响条，以便使孔中的液体充沛混匀。
8．试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标明。

ELISA试剂盒操作过程
1．取出酶标板，设空白孔，按照次第对应别离参加100μl的规范品于空白微孔中（空白孔视为0号规范品，用医用

蒸馏水代替）
2、别离标记样品编号，参加100μl的稀释样品于空白微孔中（不同的样本选用不同的吸头）。
3、将酶标板置于37℃温育30分钟；
4、将酶标板板取出，将其间的液体甩去，每个孔中悉数加满使用洗刷液后，当即甩去液体;
5、每个孔中加满使用洗刷液后，细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去，在吸水纸大将酶标板拍干。
6、重复第5个过程5次，在吸水纸大将酶标板拍干。
7、在规范品孔和样品孔中参加100μl的酶标巧合溶液。
8、将96孔板置于37℃温育30分钟。
9、将酶标板取出，将其间的液体甩去，每个孔中悉数加满使用洗刷液后，当即甩去液体。
10、每个孔中再次加满洗刷使用液后，室温细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去，在吸水纸大将酶标板

拍干。
11、重复第5个过程5次，在吸水纸大将酶标板拍干。
12、在每个孔中参加底物A 50μl后当即参加底物B 50μl。悄悄振动混匀。（A液、B液选用不同的吸头加样）
13、将酶标板置于37℃避光温育反响15分钟。
14、每个微孔中参加50μl的停止液，悄悄振动混匀。
15、在酶标仪上，450nm处测定OD; 显色后，15分钟内进行测定。
16、依据制备的规范曲线，核算样本含量