TRZOL(总RNA提取试剂)(红)产品介绍
TRZOL试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。无论是人、动物、植物还是**组织,该方法对少量及大量的组织和细胞均有较好的分离效果。TRZOL试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRZOL抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,TRZOL(总RNA提取试剂)(红)建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。 TRZOL试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
TRZOL(总RNA提取试剂)(红)产品特点
1. 质量稳定。提取出来的RNA与国外主流公司的Trizol进行平行对照实验,如下游实验:RT-PCR和Northern blot,经多个***和省市级的重
点实验室实验验证,质量和稳定性与国外主流公司的Trizol相当。
2. 完整性好。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。
3. 简便快捷。操作上的简单性允许同进处理多个样品,所有的操作可以在一个小时内完成。
4. 适用性广。TRzol试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。
TRZOL(总RNA提取试剂)(红)产品储存
TRZOL在室温下能稳定保存12个月。尽管如此,为达到*佳效果,我们建议保存在2~8°C的环境下。
注意事项
1. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA样品:往组织或细胞中加入800µl TRZOL。待样品裂解后,加入氯仿并进行步骤2中的
抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA之前,加入5~10μg无RNA酶的glycogen作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯仿前用26号注射器抽
吸两次以切断基因组DNA。Glycogen会留在水样层中并和RNA共析出。在浓缩到4mg/ml之前它不会抑制逆转录反应**链的合成也不会抑
制PCR。
2. 在匀化后和加入氯仿之前,样品可以在–60~–70°C保存至少一个月。RNA沉淀 (步骤4,RNA漂洗)溶于75%的乙醇在2~8°C至少可以
保存一周,在–5~–20°C下至少可保存一年。
3. 用TRZOL抽提RNA时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无例外,所有的操作应该在
15~30°C的条件下。
TRZOL(总RNA提取试剂)(红)实验图例
(具体操作详见说明书)