定点突变试剂盒产品介绍
基因定点突变是一种对质粒DNA序列上的指定碱基进行体外定点替换、插入或缺失等序列改变的基因操作技术，在蛋白质结构与功能以及DNA表达调控研究中是一种非常重要的技术。基因定点突变试剂盒在不需要特殊载体、不需要T4 DNA 连接酶、不需要亚克隆的条件下可以对指定碱基进行突变。试剂盒使用了具有快速扩增性、超高保真性和强大扩增能力特点的Xerox DNA聚合酶，只需以甲基化质粒为模板进行一次PCR扩增、一次酶切消化和一次转化就可以在**之内完成基因突变过程，整个过程非常简单。该试剂盒也可以同时对多个位点进行突变。
定点突变试剂盒产品特点
1. 采用完全重叠引物设计，使PCR呈指数扩增，扩增产物凝胶电泳可见；扩增产物为环状，易于转化。
2. 同类型产品只采用内切酶或感受态细胞降解非突变型质粒模板，而该试剂盒结合了上述两种方法，从而更有效地降解甲基化的质粒模板，突
变效率更高，对照突变效率可达90%。
3. 试剂盒中搭配高保真的2× Gold Pfu Mix，扩增速度和保真性大大提高，Mix的形式只需加入引物和模板，使操作更简单。
定点突变试剂盒产品储存
BMXL10-Gold Competent Cell -70储存，其他－20 ℃ 保存。
引物设计
1. 找到需要突变的碱基位点，在突变点两侧各15-20bp范围内设计一对引物，两条引物中都包含要突变成的碱基。
2. 引物长度一般控制在25-45bp，两条引物完全匹配区大约15-20bp，非匹配区至少10bp。两条引物控制Tm值大于65℃，GC含量控制在40%以
上。
3. *好将突变位点设计在两条引物完全匹配区的中心位置，以免突变位点脱落。
定点突变试剂盒适用范围
甲基化质粒中核苷酸德突变
质控检测
利用Control plasmid和Control primer检验突变效率，在含氨苄的平板上进行蓝白斑筛选，如突变成功菌落呈蓝色。
