Bradford 法蛋白定量试剂盒产品介绍
Bradford法蛋白定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一Bradford法基础上(考马斯亮蓝结合显色法)改进而成。当Bradford染色液(考马斯亮蓝)和蛋白在酸性条件下结合时,*大吸光值波长立刻由465 nm转移至595nm,同时颜色由褐色转为蓝色,通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓度。 Bradford 法蛋白定量试剂盒
产品特点
1. 灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,*小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
2. 检测速度极快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成。
3. 在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 Bradford 法蛋白定量试剂盒
产品储存
本产品收到后按照说明书指示温度存放各成份,至少九个月内有效。
注意事项
1. Bradford染色液含有刺激性或者腐蚀性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或
者生理盐水冲洗。
2. Bradford染色液中考马斯亮蓝易聚集成团,每次使用前请颠倒6-8次并且竖直抓住瓶口做水平划圈动作,旋转瓶中液体,帮助充分混匀,但
不可以上下振荡混匀。
3. 低温会降低Bradford染色液的敏感度,因此每次使用前应该使Bradford染色液回复到室温。仅仅将需要的Bradford染色液复温,可以减少复
温时间。倒出每次需要的Bradford染色液回复到室温,将原瓶放回冰箱。
Bradford 法蛋白定量试剂盒 4. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不**会造成标准
曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用**度高的加样枪。
5. 由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应
按照实际测得的标准曲线计算出大致**的蛋白浓度。
6. 需要酶标仪一台,*佳检测波长为595nm,也可以在570-610nm之间波长测定,但会降低一些敏感度;并需96孔板。如果没有酶标仪,也可以
使用普通的分光光度计测定,但是测定蛋白浓度时,需根据测定吸光度的杯子的体积,按比例调整Bradford染色液和样品的体积。使用分光
光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少
7. Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略
高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%。可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,
ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。