产品描述
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,主要具有如下特点:
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化;
② 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞③ 更适于质粒文库的构建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。
本品基因型:
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞
运输与保存方法
干冰运输。
XL10-Gold化学感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮!
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保*高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,*低化实验可能遇到的风险。
使用方法XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA或2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)置于42℃水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。
4)向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基(不含***),混匀后置于37℃摇床振荡培养1h(225-250rpm),目的是促使菌体复苏。
【注】:此步也可用LB培养基(不含***)进行菌体复苏。
5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应***的LB固体平板上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞1501 柠檬酸锂 四水合物, 99.99% metals basis L113839 美国Amresco C6H8O7·3Li 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1502 美国Amresco 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1503 美国Amresco 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1504 L-来苏糖, 99% L115557 美国Amresco C5H10O5 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1505 L-(-)-半乳糖, 99% L115558 美国Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1506 L-(-)-葡萄糖, 98% L115560 美国Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1507 乳酸银, 90% L120800 美国Amresco C3H5AgO3 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1508 昆布三糖, 90% L121033 美国Amresco C18H32O16 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1509 果聚糖, L121035 美国Amresco 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1510 D-乳糖醇 一水, 99% L121088 美国Amresco C12H24O11 · H2O 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1511 毛花苷C, 95% L121090 美国Amresco C49H76O20 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月
1512 Lys-Tyr-Lys acetate salt, ≥97% (HPLC) L121355 美国Amresco C21H35N5O5·xC2H4O2 大量 g/mg 美国/中国 上海沪震 常温,避光 12个月