产品描述
BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞是大肠杆菌BL21(DE3)pLysS经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。该菌株携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性(Camr),PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
本品适合毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达107。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞
基因型:F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。
运输和保存方法
干冰运输。
BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞于-80℃保存,pUC19质粒≤-20℃保存。有效期半年。不可于液氮中保存!
注意事项
1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞2)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
4)为确保*高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6)为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化学感受态细胞