产品描述
本品为使用大肠杆菌XL10菌株制备的化学转化超级感受态细胞,转化效率超过108 cfu/μg,广泛适用于质粒转化、基因克隆、蓝白斑筛选等用途。
XL10感受态细胞的基因型:Δ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTet rHte [F′proAB lacI qZΔM15 Tn10(Tet r) Amy Camr]
产品特性
1)XL10品系,具有四环素(Tetr)和氯霉素(Camr)抗性,新型克隆菌株。XL10 Chemically Competent Cell XL10化学感受态细胞
2)适合PCR产物、cDNA以及其他来源的非甲基化DNA的高效转化。
3)endA1,RecA1突变,确保外源DNA在宿主菌中的稳定性,有利于高质量质粒DNA提取。
4)Hte基因型,增强大片段DNA转化效率,并使宿主菌细胞生长速度大幅度提高。
5)可用于对重组质粒进行蓝白斑筛选。
6)转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
7)无外源质粒DNA残留。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化学感受态细胞
运输与保存方法
干冰运输。
XL10感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1)请勿将本品置于-20℃或液氮中保存
2)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
3)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
4)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
5)为确保*高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔。
6)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。XL10 Chemically Competent Cell XL10化学感受态细胞
使用说明
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)将离心管置于42℃水浴,不要晃动,准确热激90秒后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化学感受态细胞【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。