- 如果您对该产品感兴趣的话,可以
- 产品名称:2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)
- 产品型号:2×Hieff™ Long PCR Master Mix
- 产品展商:HZbscience
- 产品文档:无相关文档
- 发布时间:2016-07-05
- 在线询价
简单介绍
2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3’→5’外切酶活性(校对活性)的蛋白组成的混合酶,保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)配合独特的缓冲体系,Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。
产品描述
2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)
产品描述
2×HieffTM Long PCR Master Mix (No Dye)包含Long Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3’→5’外切酶活性(校对活性)的蛋白组成的混合酶,保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。配合独特的缓冲体系,Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。
Mix中不含有溴酚蓝染料,其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。收到产品后放到-20 ºC保存。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)
功能检测:50 μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增dystrophin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 Kb条带。
注意事项
1. 操作注意事项
由于Long Taq DNA Polymerase在室温下也有一定的反应活性,建议在冰上配制PCR反应体系,再置于PCR仪上进行扩增。这样有利于提高扩增的特异性,减少非特异扩增,得到良好的PCR结果。2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)
2. 引物设计注意事项
1)引物3’端*后一个碱基*好为G或者C;
2)引物3’端*后8个碱基应避免出现连续错配;
3)引物3’端尽量避免发夹结构出现;
4)引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5)引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6)引物的GC含量控制在40%-60%之间;
7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。2×Hieff™ Long PCR Master Mix (No Dye)