Picogreen dsDNA Assay Kit 双链DNA定量检测试剂盒
产品描述
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义，疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
常用的检测核酸的方法有:1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和**性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质等污染物的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。Picogreen dsDNA Assay Kit 双链DNA定量检测试剂盒
Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以**地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。
相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。Picogreen dsDNA Assay Kit 双链DNA定量检测试剂盒
若每次分析体积为2 mL，本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则各组分试剂足够2000次分析。
产品组分
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编号
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组分名称
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产品编号/规格
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保存
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10225ES84/2000T
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10225-A
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Picogreen dsDNA Quantitation Reagent
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100µl×10
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2~6℃避光干燥
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10225-B
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2×TE buffer
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50ml
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2~6℃（短期）或-20℃（长期）
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10225-C
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Calf thymus DNA standard (100µg/ml)
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1ml
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2~6℃（短期）或-20℃（长期）
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运输和保存方法
冰袋运输。Picogreen dsDNA Assay Kit 双链DNA定量检测试剂盒
保存方法参照【产品组分】各组分保存方式。其中2×TE buffer和Calf thymus DNA standard若不经常使用，请置于-20℃长期保存。
注意事项
1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。
试剂准备
1）1×TE buffer 的配制：将2×TE 用无菌去离子水（不含Dnase）等体积稀释至1×工作液。
2）PicoGreen工作液的配制：使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温；PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的（共10管）。实验当天，根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品，可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】：a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen 试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液*好在配制好数小时内使用，以保证*佳结果。Picogreen dsDNA Assay Kit 双链DNA定量检测试剂盒
