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产品详情

呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒

  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒
  • 产品型号:Nitrofurantoin(AHD)
  • 产品展商:HZbscience
  • 产品文档:无相关文档
  • 发布时间:2018-07-01
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简单介绍
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒是固相夹心法酶联**吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
产品描述

呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒

使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

1 使用目的:

本试剂盒用于肉类组织,血清和尿样中呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))残留的定量检测。

2 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒实验原理

本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))偶联抗原,加入呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))标准品或样品,游离呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))与微孔条上预包被的呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))偶联抗原互相竞争抗呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))含量成反比,通过标准曲线计算样品中呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))的含量。 

3 试剂盒组成

3.1 预包被的呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))偶联抗原的可拆酶标板:1块(12×8条)。
3.2
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ppb0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb
3.3
抗呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))抗体酶结合物:1瓶(6ml)。
3.4
显色液A1瓶(6ml)。
3.5
显色液B1瓶(6ml)。
3.6
终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
3.7
样本稀释液:1瓶(10×,  6ml),用于样品稀释用。
3.8
浓缩洗涤液:1瓶(20×20ml),用于洗板。
3.9
说明书一份。


4 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒需要而未提供的材料
4.1
设备
4.1.1
波长450nm酶标仪。
4.1.2
粉碎机。
4.1.3
量筒。
4.1.4
振荡器。
4.1.5
漏斗。
4.1.6Whatman No 1
或相当的滤纸。
4.1.7
微量移液器。
4.2
试剂
4.2.1
去离子水或蒸馏水。
4.2.2
甲醇。
5
贮存
5.1
试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻
5.2
未用完的微孔板应该密封干燥保存
6
注意事项
6.1
使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2
不要使用过期试剂盒。
6.3
试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。
6.4
标准品中含有呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD)),使用时应特别注意,操作时应带手套。
6.5
终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6.6
不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。
6.7
不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。
6.8
稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果
6.9
混合试剂时应避免起泡。
7
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒工作液准备
7.1
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))标准品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
7.2
浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用

7.3 样本稀释液:用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用
7.3
显色剂:已备用,避免光线直照
7.4
反应终止液:已备用
8
样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
8.1
10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液
8.2
强力振荡3分钟
8.3
Whatman No 1滤纸过滤
8.4
25µl处理后的样品,加入25µl样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2
9
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒酶免分析步骤
9.1
实验须知
9.1.1
实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保证回温充分,否则影响检测的**度和准确度。
9.1.2
使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
9.1.3
请不要改变分析程序
9.1.4
请使用**的微量移液器
9.1.5
操作一旦开始,请不要中断任何程序
9.1.6 ELISA
结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
9.1.7
为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
9.1.8
加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
9.2
分析步骤
9.2.1
预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测
9.2.2
取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3
样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
9.2.4
B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标准品溶液
9.2.5
在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
9.2.6
在各样品孔中加入50µl样品溶液
9.2.7
在所有孔中加入50µl的抗呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))抗体酶结合物
9.2.8
轻轻晃动反应板几秒钟。
9.3 37
℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
9.3.1
甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,*后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
9.4
反应
9.4.1
洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A,再加 50µl显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀
9.4.2 37
℃温浴10min
9.4.3
每孔中加入50µl终止液,混匀
9.4.4
450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
10
结果计算
10.1
定量分析
10.1.1
所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以**个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
B—
标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
B0—0µg/L
标准溶液的平均吸光度值
10.1.2
以呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))浓度的对数值,求得反对数即为测定液中呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))浓度Cppb
10.1.3
由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
10.2
半定量测定
10.1.1
目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
10.1.2
仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。


11 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))检测试剂盒特异性
物质 交叉反应
呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))100%
12
试剂盒参数
本试剂盒检测下限见说明书
B0
吸光度*���值应大于1.0
试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。
用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。
13
试剂盒提供的标准曲线范围见说明书。
14
分析限制
本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLCGC/MS加以确证。


 

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