单增李斯特显色培养基(Chromogenic Listeria monocytogenes Agar )
【包装规格】CRM013(干粉);SR0590(配套试剂) ;(平板)包装形式 47.3g/瓶;10支/盒;20套(φ9cm) /盒
【产品用途】单增李斯特显色培养基用于分离和初步鉴别单增李斯特菌。
【检验原理】蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;色素与单增李斯特氏菌具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在平板上,单增李斯特氏菌呈现绿~蓝绿色的光滑规则的小菌落;抑制剂和配套试剂可抑制杂菌的生长。
【单增李斯特显色培养基配方成分】配方(每升) 含量 蛋白胨 15.0g 酵母膏粉 5.0g 琼脂 15.0g 氯化钠 5.0g 色素 2.3g 抑制剂 5.0g 去离子水(平板) 1000ml *终pH 7.1±0.2(25℃)
【使用方法】
1.称取单增李斯特显色培养基干粉47.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,充分溶解,121℃高压**15min,冷至50℃左右。
2.取10支配套试剂分别加入1mL无菌水,使之完全溶解。
3.将配套试剂加入到已冷至48℃左右基础培养基中,充分混匀后倾注无菌平皿。
4.按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液,进行增菌培养后,用接种环取1环增菌液,划线接种于显色平板上,置于36±1℃培养24-48小时。
5.观察结果。致病性李斯特24h后开始出现蓝绿色,至36~48h蓝绿色明显。挑取显色平板上呈蓝绿色光滑规则,直径约1~2mm的可疑单菌落进行进一步的试验。
6.对疑似单增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管进行下一步的鉴定。 注:如产品类型为干粉,按上述1-6进行操作;若为即用型平板,按4-6进行操作即可。
单增李斯特显色培养基【质量控制】
1.外观方面 干粉基础:流动性良好的淡黄色粉末。配套试剂:淡黄色冻干粉。 制备好平板:淡黄色不透明凝胶。
2.生物学方面
下列菌株接种后于36±1℃培养24-48h生长情况如下表:
【储存条件及保质期】干粉培养基:2~8℃避光保存,用后立即旋紧瓶盖。贮存期两年。
配套试剂:2~8℃避光保存。贮存期两年。即用型平板:2~8℃避光保存,*多一周。
单增李斯特显色培养基【注意事项】
1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
3、自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
4、即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。
【废物处理】 检测之后带菌平板置于121℃下高压**30分钟后处理。
单增李斯特显色培养基【执行标准】 Q/HKSJ 03 普通微生物培养基 。
1 沙氏液体培养基 用于**的增菌培养,还用于一次性使用卫生用品**定性检测。
2 沙氏琼脂培养基 用于**的分离培养,还用于一次性使用卫生用品**菌落总数检测。 国标
3 霉菌液体培养基 胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;氯霉素可抑制**的生长。
4 马铃薯琼脂 用于霉菌的培养 国标
5 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) 供霉菌和酵母菌计数及分离培养。 国标 ISO
6 改良马丁琼脂培养基(**营养琼脂培养基) 用于**培养及药品和生物制品无菌检查用 药典
7 改良马丁培养基 (**培养基) 用于**培养及药品和生物制品无菌检查用。 药典
8 高盐察氏培养基 用于饲料中霉菌的检验 国标
9 察氏培养基 用于培养能以硝酸盐作为**氮源的**和**,及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别。
10 玫瑰红钠琼脂培养基 药典
11 孟加拉红培养基(虎红琼脂) 供霉菌和酵母的计数、分离和培养用(GB/T4789.15-2010和化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。 国标
12 亚利桑那菌琼脂 用于亚利桑那菌选择性分离培养 FDA标准 药典