pNLF1-secN [CMV/Hygro]

pNLF1-secN [CMV/Hygro] Vector sequence reference points:

Base pairs                                                   6005
CMV immediate early enhancer/promoter                        1–742
Chimeric intron                                              857–989
T7 RNA polymerase promoter                                   1033–1052
secNanoLuc® protein coding region                            1067–1663
Linker                                                       1664–1675
Multiple cloning region                                      1676–1751
SV40 late poly(A) region                                     1814–2035
SV40 early enhancer/promoter                                 2134–2546
Synthetic hygromycin (Hygr) coding region                    2577–3614
Synthetic poly(A) signal                                     3638–3686
β-lactamase (Ampr) coding region                             3947–4807
ColE1-derived plasmid replication origin                     4962–4998 

NanoLuc萤光素酶融合表达载体pNLF1-secN

更小（19.1kDa）、更亮（比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍）的 NanoLuc萤光素酶（Nluc）非常适用于蛋白融合应用。NanoLuc 融合蛋白应用广泛：作为蛋白稳定性报告基因、生物发光法细胞成像（BLI）探针或作为供体信号用于生物发光共振能量转移（BRET）研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。
NanoLuc 蛋白融合载体可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感兴趣蛋白的融合蛋白；有两类形式载体可供选择：
pNLF 载体系列：产生 N- 或 C- 端融合全长 Nluc 的融合蛋白或应用传统的克隆方法（多克隆位点）将分泌型 Nluc 克隆到感兴趣的蛋白 N 端。 
pF 载体系列：使用 Flexi Vector Cloning System 产生 N- 端或 C- 端融合蛋白；Flexi Vector Cloning System 是一种直接克隆方法，基于两种稀有酶切位点 SgfI 和 PmeI，可以在 Flexi 载体之间转换蛋白编码序列，快速、高效和高保真。

特点 - 优点
 轻松定量蛋白丰度变化：使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 进行单一试剂加样，来定量 NanoLuc 融合蛋白的信号，进而检测细胞内蛋白水平。
 生物相关性更高：NanoLuc 报告基因光信号更强，内源性表达水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被检测到，可避免过度表达造成的假象。
 使蛋白的细胞内动态变化可视化：NanoLuc 报告基因光信号更强，缩短了成像曝光时间，无需反复激发样本，从而降低了激发造成的细胞毒性反应。
 改进 BRET 研究技术：NanoLuc 拥有更强的光信号，蓝移的发射光谱，因而与荧光受体的光谱交叉更少，信噪比更佳，动态范围更宽。
 灵活的克隆选择：可使用传统克隆方法或 Flexi 克隆系统轻松将 NanoLuc 与目标蛋白的 C 端或 N 端融合。
 可实现从瞬时转染到稳定转染的轻松过渡：所有载体都含有用于建立稳定细胞���的哺乳动物筛选标志物。

应用
 化合物筛选
 蛋白: 蛋白相互作用
 蛋白: 小分子相互作用
 生物发光成像
 蛋白稳定性研究