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产品详情

pBApo-EF1α-neo

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  • 产品名称:pBApo-EF1α-neo
  • 产品型号:
  • 产品展商:HZbscience
  • 产品文档:无相关文档
  • 发布时间:2017-07-18
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简单介绍
pBApo-EF1α-neo的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到pBApo-EF1α-neo后请短暂离心,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。
产品描述

pBApo-EF1α-neo载体基本信息

载体名称: pBApo-EF1α-neo
质粒类型: 哺乳动物细胞表达载体
高拷贝/低拷贝: 低拷贝
克隆方法: 限制性内切酶,多克隆位点
启动子: EF1α
载体大小: 5167 bp
5' 测序引物及序列: --
3' 测序引物及序列: --
载体标签: 无标签
载体抗性: 氨苄青霉素
筛选标记: 新霉素(Neomycin)
克隆菌株: TOP10, DH5α, JM109
宿主细胞(系): 常规细胞系,293、CV-1、CHO等
备注: pBApo-EF1α-neo载体可用来表达microRNA和其它转录产物;
很容易将{promoter+ORF+PolyA signal}框转移到腺病毒 载体上,用于构建腺病毒载体。
产品目录号: 3243
稳定性: 瞬表达 或 稳表达
组成型/诱导型: 组成型
病毒/非病毒: 非病毒

pBApo-EF1α-neo载体质粒图谱和多克隆位点信息

pBApo-EF1α-neo

pBApo-EF1α-neo载体简介

pBApo-EF1α-Neo DNA是一种简单的应用于哺乳动物细胞的基因表达载体。该载体具有人多肽链延伸因子基因来源的启动子 (EF1α promoter)、单纯疱疹病毒胸苷激酶来源的polyA信号、新霉素抗性基因。通过在MCS区域插入目的基因的开放阅读框 (ORF),构建目的基因表达载体。除了通常的基因以外该载体可以用于pri-microRNA的转录。此外,还可以很容易地将 (promoter+ORF+PolyA signal) 从这个载体上转移到腺病毒载体上,尤其是转移到Adenovirus Dual Expression Kit (Code No.: 6170) 的组分pAxcwit上。腺病毒载体感染效率高,范围广,可以用于体外和体内的基因转导。

使用方法
1. 插入基因
在质粒载体的克隆位点处插入目的基因的开放阅读框(ORF)。因为载体上有氨苄青霉素抗性基因,可以从大肠杆菌中筛选重组体。
2. 转染
使用 TransIT 系列、Xfect 系列(Clontech)等转染试剂将质粒导入细胞内。转染条件请参考转染试剂的实验流程。
3. 转染细胞的筛选
pBApo-EF1αNeo DNA 具有新霉素抗性基因、pBApo-EF1αPur DNA 具有嘌呤霉素抗性基因,可以利用***筛选转染细胞。
在质粒转染后培养 24 小时以上,开始使用***筛选。在细胞密度较高的情况下,可以适当地稀释细胞后重新培养。每 3~4 天更换含***的培养基。通常 1~2 周可以获得转染细胞的克隆。由于不同细胞对***的耐药性不同,需要研讨适合的***浓度。通常 NeoR(新霉素)浓度为 500~1,000 μg/ml,PurR(嘌呤霉素)浓度为 1~3 μg/ml。
4. 置换表达框(unit)
pBApo-EF1α系列载体经过 Cla I 或 EcoR V 酶切,将表达框(unit)(EF1a promoter+插入基因+PolyA signal)从质粒中切出,可以轻易地转移至其他载体上。特别是 Adenovirus Dual Expression Kit(Code
No. 6170),该载体多克隆位点上有 Cla I 和 Smi I 酶切位点,可以很轻易地将表达框转移至腺病毒载
体上。(EcoR V 和 Smi I 都产生是平滑末端,适合片段与腺病毒载体连接) 

pBApo-EF1α-neo载体序列

hz-8129R CCDC36/CT74  肿瘤/睾丸抗原74抗体
hz-8130R CCDC38  卷曲螺旋结构域蛋白38抗体
hz-8131R CCDC42  卷曲螺旋结构域蛋白42抗体
hz-8132R CCDC43  卷曲螺旋结构域蛋白43抗体
hz-8133R CCDC46  卷曲螺旋结构域蛋白46抗体
hz-8134R CCDC47  卷曲螺旋结构域蛋白47抗体
hz-8135R CCDC54/NYD-SP17  卷曲螺旋结构域蛋白54抗体
hz-2415R Ankyrin G  锚定蛋白G抗体
hz-8136R CCDC61  卷曲螺旋结构域蛋白61抗体
hz-8137R CCDC63  卷曲螺旋结构域蛋白63抗体
hz-8138R CCDC8  卷曲螺旋结构域蛋白8抗体
hz-8139R CCDC83  卷曲螺旋结构域蛋白83抗体
hz-8140R CCDC87  卷曲螺旋结构域蛋白87抗体
hz-2040R ANP  心钠素抗体
hz-8141R CCDC88B/BRLZ/HkRP3  大脑亮氨酸拉链结构域蛋白抗体
hz-8142R CCDC92  卷曲螺旋结构域蛋白92抗体
hz-8143R CCDC93  卷曲螺旋结构域蛋白93抗体
hz-8144R CCDC96  卷曲螺旋结构域蛋白96抗体
hz-8145R CHCHD5  卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD5抗体
hz-8146R CHCHD6  卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体
hz-8148R CHCHD8  卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体
hz-8149R Slc22a5  溶质载体家族蛋白22成员5抗体
hz-8150R NPFF/FMRFamide  **痛觉调节肽NPFF抗体
hz-8151R FAM36A  FAM36A蛋白抗体

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