pHIL-S1载体的详细信息如下:
• pHIL-S1载体大小8,260 bp,是融合表达载体。
• 载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I.
• 利用PHO1分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。
• 在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。
• 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
• 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型)
•为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型)
•将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。