pAd/BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway 载体 (pAd/BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway Vector) 可用于在体内高效导入和瞬时表达来自腺病毒载体的短发夹 RNA (shRNA)。 新型克隆方法将约 50 bp DNA 寡核苷酸克隆到 BLOCK-iT-U6 入门载体中紧随 U6 polIII 启动子之后的位置。 将入门载体高效重组到 pAd/BLOCK-iT-DEST 载体后进行病毒制备和转导，随后 U6 启动子驱动的 shRNA 可在大多数分裂或非分裂哺乳动物细胞类型中瞬时表达。 生成的 shRNA 可避开宿主防御机制，将有效产生 RNAi 基因抑制反应。
pAd/BLOCK-iT-DEST 载体（图 1）提供：
• attR 位点环绕的无启动子区域，用于与侧翼序列为 attL 的包含RNAi 表达盒的 U6 Gateway入门载体或任何侧翼具有 attL 的启动子和基因序列进行高效重组
• 高效包装腺病毒和导入目的 shRNA 所需的所有组分。 使用这种载体，可对分裂和非分裂哺乳动物细胞以及动物模型中的基因抑制进行瞬时分析。
