Vero【非洲绿猴肾细胞】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
Vero【非洲绿猴肾细胞】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
Vero【非洲绿猴肾细胞】培养条件
EMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
Vero【非洲绿猴肾细胞】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
Vero【非洲绿猴肾细胞】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
NIH/3T3【小鼠胚胎细胞】 D048 NIH/3T3 小鼠胚胎细胞 小鼠 DMEM 贴壁
Psi2 DAP【小鼠胚胎成纤维细胞】 D049 Psi2 DAP 小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠
MS1【小鼠胰岛内皮细胞】 D050 MS1 小鼠胰岛内皮细胞 小鼠
SV40 MES 13【小鼠肾小球系膜细胞】 D051 SV40 MES 13 小鼠肾小球系膜细胞 小鼠
OP9【小鼠骨髓基质细胞】 D052 OP9 小鼠骨髓基质细胞 小鼠 1640 贴壁
C2C12【小鼠成肌细胞】 D053 C2C12 小鼠成肌细胞 小鼠 DMEM 贴壁
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]【小鼠成纤维细胞】 D054 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纤维细胞 小鼠
TM3【小鼠睾丸间质细胞】 D055 TM3 小鼠睾丸间质细胞 小鼠
B95-8【绒猴EBV转化的白细胞】 D056 B95-8 绒猴EBV转化的白细胞 绒猴
Mv.1.Lu(NBL-7)【貂肺上皮细胞】 D057 Mv.1.Lu(NBL-7) 貂肺上皮细胞 貂
OK【负鼠肾细胞】 D058 OK 负鼠肾细胞 负鼠
NRK【大鼠肾细胞】 D059 NRK 大鼠肾细胞 大鼠