WISH【人羊膜细胞】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
WISH【人羊膜细胞】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
WISH【人羊膜细胞】培养条件
EMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
WISH【人羊膜细胞】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
WISH【人羊膜细胞】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
HEP 3B【人肝癌细胞】 D266 HEP 3B 人肝癌细胞 人 EMEM 贴壁
PK-15【猪肾细胞】 D267 PK-15 猪肾细胞 猪 DMEM 贴壁
A2780【人卵巢癌细胞】 D268 A2780 人卵巢癌细胞 人 DMEM 贴壁
CA46【Burkitts**癌细胞系】 D269 CA46 Burkitts**癌细胞系 人 1640 悬浮
Neuro-2a【小鼠脑神经瘤细胞】 D270 Neuro-2a 小鼠脑神经瘤细胞 小鼠 EMEM 贴壁
BSC-1【猴肾细胞】 D272 BSC-1 猴肾细胞 猴 MEM 贴壁
ST【猪睾丸细胞系】 D273 ST 猪睾丸细胞系 猪 DMEM 贴壁
HEP-2【人喉表皮样癌细胞】 D274 HEP-2 人喉表皮样癌细胞 人 DMEM 贴壁
QSG7701【人肝细胞】 D275 QSG7701 人肝细胞 人 1640 贴壁
QGY7701【人肝癌细胞】 D276 QGY7701 人肝癌细胞 人 1640 贴壁
BGC-823【人胃腺癌细胞(低分化)】 D277 BGC-823 人胃腺癌细胞(低分化) 人 1640 贴壁
SMMC7721【人肝癌细胞】 D280 SMMC7721 人肝癌细胞 人 1640或DMEM 贴壁