RKO-AS45-1【人结肠癌转基因细胞】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
RKO-AS45-1【人结肠癌转基因细胞】描述
细胞生长:见说明书
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
RKO-AS45-1【人结肠癌转基因细胞】培养条件
见说明书,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
RKO-AS45-1【人结肠癌转基因细胞】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
RKO-AS45-1【人结肠癌转基因细胞】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
KLE(人**内膜癌细胞)
QG-56(人肺扁平上皮癌细胞)
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)
KG-1(人急性骨髓性白血病细胞)
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞)
PC-3M IE8(人前列腺癌高转移细胞株)
PC-3M-2B4(人前列腺癌低转移细胞株)
PC-12(未分化)(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化))
PA-1(人卵巢畸胎瘤细胞)
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](小鼠骨髓瘤细胞)
NEC(人食管癌细胞)
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞)
KB(人口腔表皮样癌细胞)
NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞)
K-562(人慢性髓原白血病细胞)
Jurkat, Clone E6-1(人T**细胞白血病细胞)
JeKo-1(人套细胞**瘤细胞)