HMC-1人肥大细胞HMC1 Cell
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种属
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人
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别称
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HMC1
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组织来源
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癌细胞系
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肥大细胞白血病
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传代比例/细胞消化
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1:2传代
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完全培养基配置
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IMDM培养基 ；10%胎牛血清 ；1%双抗
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形态
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细胞样
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生长特征
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悬浮生长
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STR
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Amelogenin X CSF1PO 10,13 D2S1338 17,25 D3S1358 15 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D8S1179 12
D13S317 10,11 D16S539 10,12 D18S51 14,20 D19S433 14 D21S11 29 FGA 18,20 Penta D 11
Penta E 9,19 TH01 7,9.3 TPOX 8,11 vWA 17,19
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倍增时间
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每周 2-3次
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培养条件
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气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
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冻存条件
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冻存液：90%FBS，DMSO 10%,
或使用非程序冻存液：
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备注
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该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。
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产品使用
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于科学研究，不可作为动物或人类的产品使用。
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传代方法
显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。在生物柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。
传代密度均匀，有以下几点比较重要：
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹，一上来就加1-2ml胰酶，结果细胞团大片脱落，虽然有后续吹打步骤，但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞，怎么掌握分寸，还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上，我觉得细胞吹匀，这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管，加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
来源于一名 52 岁男性肥大细胞白血病患者的外周血样本。该细胞有多重亚型分别为：HMC-1 5C6，HMC-1.1 ，HMC-1.2 。广泛用于人肥大细胞功能研究，因为它们表现出组织肥大细胞的许多关键特征，例如组胺、类胰蛋白酶、肝素和类似细胞表面抗原谱的表达 （1,2）。受体酪氨酸激酶 KIT 在肥大细胞上表达，在肥大细胞的增殖、功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突变与肥大细胞生长失调有关，并与肥大细胞肿瘤和系统性肥大细胞增多症有关。据报道，HMC-1 细胞系中存在两个 KIT 激活点突变 。这两种突变都将受体转化为组成型酪氨酸磷酸化和活性状态，导致生长因子非依赖性增殖。HMC-1.1 （HMC-1（560）） 和 HMC-1.2 （HMC-1（560,816））是HMC-1 细胞系的两个变异亚系。HMC-1.1 具有 V560G 突变，但不具有 D816V 突变。HMC-1.2 同时具有 V560G 和D816V 突变，并且表现出比 HMC-1.1 更高的增殖率。有人认为，HMC-1.2 的较高增殖潜力可能归因于 D816V 突变
