CCC-HEH-2【人胚心肌组织来源细胞】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
CCC-HEH-2【人胚心肌组织来源细胞】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
CCC-HEH-2【人胚心肌组织来源细胞】培养条件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
CCC-HEH-2【人胚心肌组织来源细胞】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
CCC-HEH-2【人胚心肌组织来源细胞】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
NCI-H929细胞 人骨髓瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S+50uM 2-巯基乙醇 悬浮
NCTC1469细胞 小鼠正常肝细胞 DMEM +10%马血清+1%P/S
NCTC clone 1469细胞 小鼠肝上皮细胞 DMEM +10%马血清+1%P/S
neuro-2a细胞 小鼠脑神经瘤细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
NK-92细胞 人恶性非霍奇金**瘤患者的自然杀伤细胞 1640+0.2mM肌醇,0.1mM β-Me,0.02mM叶酸,100U IL-2,马血清12.5%,上等胎牛血清,12.5%。
NIH/3T3细胞 小鼠胚胎细胞 DMEM+15%FBS+1%P/S 小牛血清培养不好
NR8383细胞 大鼠肺泡巨噬细胞 F12K+15%FBS+2 mM L-谷氨酰胺+ 1%P/S 悬浮和贴壁混合
NRK-52E细胞 大鼠肾细胞 DMEM+10%小牛血清+10ng/mlEGF+1%P/S 贴壁(FBS养不好)
OAR-L1细胞 绵羊肺成纤维细胞 DMEM+10%FBS+ 1%P/S 贴壁
OCM-1A细胞 人低侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S
OCI-LY10细胞 弥漫大B细胞**瘤细胞? 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮