OSK-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】代数低,状态好,发货快,细胞库管理规范,种类齐全,价格优惠,在做传代细胞培养之前,首先将培养瓶置于显微镜下,观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,即可进行细胞的传代培养。
OSK-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】描述
细胞生长:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
细胞冻存:液氮冻存(完全培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1
Vial)或活细胞运输(T-25
flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**
OSK-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】培养条件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
OSK-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
OSK-1【小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)】传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
Bel-7404细胞 人肝癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
Bel-7405细胞 人肝癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
Bel/Fu细胞 人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株 1640+10%FBS加20ug/ml 5-Fluoroural+1%P/S 贴壁
BETA-TC-6细胞 小鼠胰腺癌beta细胞 DMEM+15%FBS+1%P/S 贴壁
BGC-823细胞 人胃腺癌细胞(低分化) 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
BHK-21细胞 幼仓鼠肾细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
BJ细胞 人皮肤成纤维细胞 EMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
BRL-3A细胞 大鼠肝细胞 MEM+10%FBS +1%P/S贴壁
BT-20细胞 人乳腺癌细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
BT474细胞 人乳腺癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
BT-549细胞 人乳腺癌细胞 1640+0.023U/ml胰岛素+10%FBS +1%P/S 贴壁
BV2细胞 小鼠小胶质细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁